Pilotstudie zur Methodenetablierung und Expressionsanalyse bei transgenen Ratten, die ubiquitär humane plazentäre Alkalische Phosphatase (hPLAP) exprimieren

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Dr. Eric Sandgren, University of Madison, Wisconsin, USA, wird mir transgene Fischer-344-Ratten (R26-hPLAP F-344) zur Verfügung stellen, die ubiquitär humane plazentäre Alkalische Phoshatase (hPLAP) exprimieren. Wahrscheinlich tragen alle Körperzellen dieser Ratten-Linie den genetischen Marker hPLAP. Dieses Enzym ist hitzestabil und überdauert die Paraffin-Einbettung. Diese Tiere stellen möglicherweise ein ideales Modell dar, mit dem sich Fragen zur Zell-Lineage und zur Herkunft von Osteoblasten und Osteoklasten im Knochen in sehr eleganter Weise bearbeiten lassen. Die vorliegende Pilotstudie soll zunächst folgende Fragen beantworten: Welche Methode eignet sich am besten für den Nachweis von hPLAP im Knochen? Läßt sich hPLAP auch in Kunststoff-eingebetteten Präparaten nachweisen? Exprimieren Vorläuferzellen von Osteoblasten und Osteoklasten in R26-hPLAPtransgenen Ratten hPLAP? Exprimieren Monozyten im peripheren Blut von R26-hPLAP-trangenen Ratten hPLAP? Lassen sich genetisch markierte Zellen im Knochenmark von normalen Fischer344-Ratten wiederfinden, die mit Blutzellen und Vorläuferzellen für Osteoblasten von hPLAP-transgenen Ratten infundiert wurden? Mit diesen Untersuchungen soll die Basis für spätere Studien zur Zell-Lineage von Osteoblasten und Osteoklasten gelegt werden.