軸索切断後の網膜神経節細胞で発現が誘導される分子群の機能の解明

阐明轴切术后在视网膜神经节细胞中诱导表达的分子的功能

• 批准号: 13771011
• 负责人: 若林 毅俊
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771011/
• 关键词: BH3-only protein; Hrk; BimEL; 網膜神経節細胞; 軸索切断

視神経切断後の網膜神経節細胞死に関わる分子として、BH3-only proteinについて注目した。BH3-only proteinは、種々の異なるアポトーシス誘導刺激と、共通したアポトーシス決定、実行過程との間をつなぐ分子であり、刺激特異的なアポトーシス誘導のメカニズムを明らかにする上でキーとなる分子と考えられる。その中で、特にHrkおよびBimELについて解析した。Hrkは視神経切断後の網膜神経節細胞で特異的に発現が誘導されること、またその発現が少なくとも1週間は持続することを明らかにした。また、発現量の変化を定量するため、realtime PCRを行なった。その結果、Hrkは視神経切断後1日で、正常網膜の3倍まで発現が上昇することがわかった。一方、BimELはHrkと同様にその活性調整が転写レベルで行われているため、Hrkと同様に定量PCRを行ったBimELにおいても約2倍に発現が上昇した。今後、免疫染色により、BimELの発現誘導される細胞種と、サブタイプを明らかにする。一方、申請者が単離した分子ARG357についての解析も進んでいる。ARG357を発現ベクターpCI-neoに組み込み、これを神経系細胞のモデルであるPC12細胞に導入した。WST-8によるアッセイではARG357が導入された細胞と、コントロール細胞との間で細胞増殖、血清除去後の細胞死には明らかな差は認められなかった。一方、ARG357が導入された細胞ではBimELの発現レベルが上昇したがHrkの発現レベルには影響がなかった。以上の結果から、ARG357はBimELの転写レベルの調整に関与すること、BimELとHrkはその転写活性化メカニズムが異なることが明らかとなった。今後、この発現誘導メカニズムと、BimEL,ARG357の相互作用を明らかにする。

The death of retinal ganglion cells after neurotomy is related to molecular and BH3-only protein. BH3-only protein, species-specific, stimulus-induced, stimulus-specific, stimulus-specific, stimulus-induced, stimulus-specific, stimulus-specific, stimulus- Hrk Hrk is responsible for the induction and development of specific retinal ganglion cells after neurotomy. Realtime PCR was performed in the quantitative analysis of detection and detection. The results showed that Hrk increased 1 day after neurotomy, and 3 times of normal retina appeared. One side, BimEL, Hrk, Hrk. In the future, immunostaining, BimEL expression induction, cell species, and cell culture will be performed. One party, the applicant is separated from the molecule ARG357. ARG357 was found in PC12 cells. WST-8 is the first to introduce ARG357 into cells, and the second to proliferate cells, and the third to kill cells after serum removal. On the other hand, ARG357 was introduced into the cells, and the expression of BimEL increased. As a result, ARG357 has been activated by BimEL and Hrk. In the future, the interaction between BimEL and ARG357 will be clarified.

项目成果

Yamamoto N, Wakabayashi T, Murakami K: "Intraocular and plasma HIV-1 RNA in HIV-infected patients with CMV retinitis and HIV-infected controls"Scand. J. Infect Dis.. 34(10). 742-745 (2002)

Yamamoto N、Wakabayashi T、Murakami K：“患有 CMV 视网膜炎的 HIV 感染患者和 HIV 感染对照的眼内和血浆 HIV-1 RNA”扫描。

Yamamoto, N., Wakabayashi, T., Murakami, K., Hommura, S.: "Detection of CMV DNA in the Aqueous Humor of AIDS Patients with CMV Retinitis by AMPLICOR CMV Test"Ophthalmologica. 217(1). 45-48 (2003)

Yamamoto, N.、Wakabayashi, T.、Murakami, K.、Hommura, S.：“通过 AMPLICOR CMV 测试检测患有 CMV 视网膜炎的艾滋病患者房水中的 CMV DNA”眼科。

Taketoshi Wakabayashi: "porterin capsule stainig and pasterion continnous curilinear capsn lorhexis in pechetric cataraet"Journal of Cataraet & Refrcehve surgery. (in press).

Taketoshi Wakabayashi：“pechetric cataraet 中的 porterin 胶囊染色和 Pasterion 连续曲线 capsn lorhexis”Journal of Cataraet

Wakabayashi T, Yamamoto N: "Posterior capsule staining and posterior continuous curvilinear capsulorhexis in congenital cataract"J Cataract Refract Surg. 28(11). 2042-2044 (2002)

Wakabayashi T、Yamamoto N：“先天性白内障的后囊染色和后连续曲线撕囊术”J Cataract Refract Surg。

Wakabayashi T, Kosaka J, Hommura S.: "Up-regulation of Hrk, a regulator of cell death, in retinal ganglion cells of axotomized rat retina"Neurosci Lett.. 318(2). 77-80 (2002)

Wakabayashi T、Kosaka J、Hommura S.：“在轴突大鼠视网膜的视网膜神经节细胞中，细胞死亡调节剂 Hrk 的上调”Neurosci Lett.. 318(2)。