視細胞株を用いた視細胞変性に対する薬剤の検討

使用感光细胞系检查治疗感光细胞变性的药物

• 批准号: 13771009
• 负责人: 富田 浩史
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771009/
• 关键词: 網膜神経細胞; カスパーゼ; アポトーシス; 視細胞; 神経栄養因子

昨年度までに、温度感受性SV40 large T抗原遺伝子導入ラット網膜から単離された視細胞株(clone : tsSV40 p-2)を用いて、視細胞死に対して保護作用を有する因子を検討してきた。in vivo動物実験モデルにおいて現在までに視細胞変性に対して保護効果を有することが報告されている栄養因子(BDNF, CNTF)の保護作用について調べた結果、BDNF, CNTFの培地中への添加によって、血清除去によって誘導される細胞死が顕著に抑制された。また、アデノウイルスベクターを用いてCNTF, BDNF遺伝子をtsSV40 p-2に導入したところ、細胞死が、導入しない群に比較して遅延することが明らかとなってきた。本年度は現在市販されている薬剤の中から網膜神経細胞死に対して保護作用を有する薬剤を見出すため、薬剤のスクリーニングを行った。ベタキソロールは緑内障治療薬として使用されている薬剤である。摘出網膜を用いた研究で、低酸素負荷に対する細胞障害に対して、ベタキソロールは保護作用を有することが明らかとなった。また、ベタキソロールの保護のメカニズムは電位依存性カルシウムチャネルブロッカーとして作用することによるとすでに報告されていたが、この研究で細胞外からのカルシウム流入を抑制するだけではなく、細胞カルシウム濃度を別の機構でコントロールしている可能性が示された。また、ベタキソロールと同様緑内障点眼薬であるニプラジロールの保護効果についても検討した。ニプラジロールは一酸化窒素遊離作用を有することが知られている。軸索切断による網膜神経節細胞死に対して保護作用を持つこと、培養細胞を用いた研究でそのメカニズムはcGMP依存性のカスパーゼ活性抑制とカスパーゼのニトロソ化による直接的な酵素活性抑制が介在していることが明らかとなった。

To investigate factors that may protect against cell death when introduced into retina with SV40 large T antigen gene (tsSV40p-2). In vivo, the protective effects of BDNF and CNTF are reported to be regulated by the protective effects of BDNF and CNTF, and cell death is inhibited by the addition of BDNF and CNTF to culture medium and by the removal of serum. CNTF, BDNF gene tsSV40 p-2, cell death, and group introduction are all important aspects of the study. This year, the protective effect of retinal neurons in the treatment of brain damage was observed. The treatment of cataracts is not easy. In the study of retinal application, low acid load caused cell damage, and the protective effect of low acid load caused cell damage. The potential dependence of the cell cycle on the cell cycle and the effect of the cell cycle on the protection of the cell cycle are reported. The possibility of inhibition of the extracellular cycle and the cell cycle concentration is shown. The protective effect of cataract is discussed in detail. The first step is to remove the acid from the solution. The protective effect of axonectomy on retinal ganglion cells was studied in vitro. The direct inhibition of enzyme activity was mediated by the inhibition of cGMP dependence.

项目成果

Abe T, Tomita H, Kano T, et al.: "Autologous iris pigment epithelial cell transplantation in monkey subretinal region"Curr Eye Res. 20. 268-275 (2000)

Abe T、Tomita H、Kano T 等人：“猴视网膜下区域的自体虹膜色素上皮细胞移植”Curr Eye Res。

Nakazawa, T, Tomita, H, Yamaguchi, K et al.: "Neuroprotective effect of nipradilol on axotomized rat retinal ganglion cells"Curr Eye Res. 24. 114-122 (2002)

Nakazawa, T, Tomita, H, Yamaguchi, K 等人：“尼普地洛对轴突大鼠视网膜神经节细胞的神经保护作用”Curr Eye Res。

Tomita, H, Nakazawa, T, Sugano, E et al.: "Niprdilol inhibits apoptosis by preventing the activation of caspase-3 via S-nitrosylation and the cGMP-dependent pathway"Eur J Pharmacol. 452. 263-270 (2002)

Tomita, H, Nakazawa, T, Sugano, E 等人：“尼普地洛通过 S-亚硝基化和 cGMP 依赖性途径阻止 caspase-3 的激活，从而抑制细胞凋亡”Eur J Pharmacol。

Yamaguchi K, Tomita H, Sugano E, et al.: "MAP Kinase Inhibitor, PD98059, Inhibits Rat RPE Cell Replication by Cell Cycle Arrest"Jpn J Ophthalmol. (in press). (2002)

Yamaguchi K、Tomita H、Sugano E 等人：“MAP 激酶抑制剂，PD98059，通过细胞周期停滞抑制大鼠 RPE 细胞复制”Jpn J Ophamol。

Sakuragi M, Tomita H, Abe T, Tamai M: "Changes of phagocytic capacity in basic fibroblast growth factor-transfected iris pigment epithelial cells in rats"Curr Eye Res. 23. 185-191 (2001)

Sakuragi M、Tomita H、Abe T、Tamai M：“碱性成纤维细胞生长因子转染的大鼠虹膜色素上皮细胞吞噬能力的变化”Curr Eye Res。