粘膜の炎症におけるレチノイン酸の役割と作用メカニズムについて

视黄酸在粘膜炎症中的作用及作用机制

• 批准号: 13771083
• 负责人: 竹之内 信子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771083/
• 关键词: retinoic acid; polymeric immunoglobulin receptor; NF-κB; TNF-a

TNF-αによるplgR遺伝子発現がレチノイン酸によって増加するメカニズムについて,特に転写レベルでの制御について詳細に検討した。1)レチノイン酸によるNF-κBの変化についてHT-29細胞において,TNF-αによるpIgR遺伝子発現にはNF-κBが関与していることがすでに明らかである。そこで,レチノイン酸によりNF-κBの活性化に変化があるかを検討する目的で,HT-29細胞をTNF-α単独,またはTNF-αとall trans-レチノイン酸で90分間刺激し,nuclear extractを調製してpIgR 5'上流域に存在するNF-κB結合部位(κB2)をプローブとしてgel shift assayを行った。その結果,レチノイン酸を加えることでκB2に結合するNF-κBの量に変化は見られなかった。2)retinoic acidがRNA polymerase IIに及ぼす影響についてレチノイン酸によるpIgR遺伝子発現量の増加が,転写の活性化によるものなのか,それともmRNAの安定性によるものなのかを検討する目的で,HT-29細胞をTNF-α単独またはTNF-αとall trans-レチノイン酸で48時間刺激後,RNA polymerase II阻害剤である5,6-dichloro-1-β-ribofuranosyl-benzimidazole(DRB)を加えて0,1,3,6時間後のpIgR mRNA量の変化をnorthen blot法により検討した。その結果,TNF-α単独ではDRBを加えることでpIgR mRNA量が減少した。しかしながらall trans-レチノイン酸を加えても,DRBによるpIgR mRNA量の変化は見られなかった。以上の結果からレチノイン酸によるpIgR遺伝子発現の増加は,転写の活性化ではなくmRNAの安定性が増加することによるものであることが示唆された。

TNF-α gene expression increases in the production of TNF-α protein, especially in the production of TNF-α protein. 1) NF-κB activation in HT-29 cells,TNF-α activation in pIgR gene expression and NF-κB activation in HT-29 cells. For the purpose of investigating the activation of NF-κB in HT-29 cells, TNF-α alone and TNF-α and all trans-κ B were stimulated by 90 minutes of nucleic acid to modulate the presence of NF-κB binding site (κB2) in the pIgR5 'upstream region. As a result, the amount of NF-κB binding in the presence of KB2 was reduced. 2)To investigate the effects of retinoic acid on RNA polymerase II and pIgR gene production, mRNA activation and mRNA stability,HT-29 cells were treated with TNF-α alone and TNF-α alone for 48 hours, and RNA polymerase II inhibitor 5,6-dichloro-1-β-ribofuranosyl-benzimidazole(DRB) was increased to 0. Changes in pIgR mRNA levels after 1, 3, and 6 hours were detected by northern blot. As a result,TNF-α alone decreased the amount of pIgR mRNA. All trans-and DRB-and pIgR-mRNA levels are increasing. The results showed that the expression of pIgR gene increased, and the stability of pIgR mRNA increased.