ヒトSecretory Component遺伝子発現調節機構の解析

人类分泌成分基因表达调控机制分析

• 批准号: 05771494
• 负责人: 竹之内 信子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771494/
• 关键词: 分泌型IgA; Secretory Component; IFN-gamma; TNF-alpfa; IL-4; IL-1beta; Northern Blot

本年度はSecretory Component(SC)遺伝子発現調節機構解析の一端として2つの研究を進めた。その第1はサイトカインによるSCmRNA発現である。IFN-gamma,TNF-alpfaの刺激によりHT-29細胞培養上清中にSC量が増加することが、また、IL-4により^<125>I-ラベルしたpolymeric-IgAとの結合量が増加することが知られている。今回、それらの増加がmRNAレベルでもみられることをNorthern Blot法により明らかとした。また新たにIL-1betaによるSCmRNA発現の有意な増加も明らかにした。さらに、SCmRNA発現調節機構を詳細に検討するために、ヒトSC遺伝子のプロモーター領域の構造解析に着手した。JCRB遺伝子バンクより供与されたhuman genomic DNA livraryより約200万個のプラークを、ECL direct DNA labelling systemでラベルしたhuman SC cDNA EcoRI-PvuII fragment(Exonl^〜Exon3の一部を含む)を用いてスクリーニングし、1個のクローンを得た。さらに制限酵素消化による制限マップの作製を行なった。Exon1に対応するoligomerを作製し、Southern hybridizationを行なった結果、left arm側約1.5kbにhybridizeするバンドが得られた。このfragmentに遺伝子発現に寄与するプロモーター配列が含まれるかどうか、現在検討中である。これらの成果の一部は本報告書に記載したとおり論文とした。また、他の一部についてはより詳細な検討を重ね、報告を行なう予定である。

This year, the research on Secretarial Component(SC) gene discovery and regulation mechanism has been carried out. SCmRNA expression in the first part of the study. Stimulation of IFN-gamma,TNF-alpfa increased SC levels in HT-29 cell culture supernatants, and IL-4 levels increased <125>polymeric-IgA binding. The Northern Blot method was used to detect the presence of mRNA. The expression of IL-1 beta mRNA was intentionally increased. This paper discusses the mechanism of SC mRNA expression in detail, and analyzes the structure of SC mRNA expression. JCRB cDNA library contains about 2 million human genomic DNA fragments. ECL direct DNA labeling system contains about 1 human SC cDNA EcoRI-PvuII fragment(Exonl^~ Exon3). The restriction enzyme digestion process is carried out by the restriction enzyme digestion process. Exon1: Southern Hybridization: About 1.5kb on left arm This fragment is the first to appear in the database. The results of this paper are recorded in this report. A detailed review of the report is scheduled.

项目成果

茂呂周,小宮山一雄,草間薫,高橋富久,竹之内信子: "分泌型免疫グロブリン" G.I.Research. 1. 802-808 (1993)

Shu Moro、Kazuo Komiyama、Kaoru Kusama、Tomihisa Takahashi、Nobuko Takenouchi：“分泌的免疫球蛋白”G.I.Research 1. 802-808 (1993)。

竹之内信子,高橋富久,岩瀬孝志,樋宮孝雄,宇佐見勉,斉藤学,茂呂周: "腸管上皮細胞におけるSC,IL-6,TGF-beta1の発現" 消化器と免疫. 28. 96-99 (1993)

Nobuko Takenouchi、Tomihisa Takahashi、Takashi Iwase、Takao Himiya、Tsutomu Usami、Manabu Saito、Shu Moro：“肠上皮细胞中 SC、IL-6 和 TGF-β1 的表达”胃肠道和免疫学。 ）