ヒトSecretory Component遺伝子発現調節機構の解析

本年度はSecretory Component(SC)遺伝子発現調節機構解析の一端として2つの研究を進めた。その第1はサイトカインによるSCmRNA発現である。IFN-gamma,TNF-alpfaの刺激によりHT-29細胞培養上清中にSC量が増加することが、また、IL-4により^<125>I-ラベルしたpolymeric-IgAとの結合量が増加することが知られている。今回、それらの増加がmRNAレベルでもみられることをNorthern Blot法により明らかとした。また新たにIL-1betaによるSCmRNA発現の有意な増加も明らかにした。さらに、SCmRNA発現調節機構を詳細に検討するために、ヒトSC遺伝子のプロモーター領域の構造解析に着手した。JCRB遺伝子バンクより供与されたhuman genomic DNA livraryより約200万個のプラークを、ECL direct DNA labelling systemでラベルしたhuman SC cDNA EcoRI-PvuII fragment(Exonl^〜Exon3の一部を含む)を用いてスクリーニングし、1個のクローンを得た。さらに制限酵素消化による制限マップの作製を行なった。Exon1に対応するoligomerを作製し、Southern hybridizationを行なった結果、left arm側約1.5kbにhybridizeするバンドが得られた。このfragmentに遺伝子発現に寄与するプロモーター配列が含まれるかどうか、現在検討中である。これらの成果の一部は本報告書に記載したとおり論文とした。また、他の一部についてはより詳細な検討を重ね、報告を行なう予定である。

本年度はSecretory Component(SC)遺伝子発現調節機構解析の一端として2つの研究を進めた。その第1はサイトカインによるSCmRNA発現である。IFN-gamma,TNF-alpfaの刺激によりHT-29細胞培養上清中にSC量が増加することが、また、IL-4により^<125>I-ラベルしたpolymeric-IgAとの結合量が増加することが知られている。今回、それらの増加がmRNAレベルでもみられることをNorthern Blot法により明らかとした。また新たにIL-1betaによるSCmRNA発現の有意な増加も明らかにした。さらに、SCmRNA発現調節機構を詳細に検討するために、ヒトSC遺伝子のプロモーター領域の構造解析に着手した。JCRB遺伝子バンクより供与されたhuman genomic DNA livraryより約200万個のプラークを、ECL direct DNA labelling systemでラベルしたhuman SC cDNA EcoRI-PvuII fragment(Exonl^〜Exon3の一部を含む)を用いてスクリーニングし、1個のクローンを得た。さらに制限酵素消化による制限マップの作製を行なった。Exon1に対応するoligomerを作製し、Southern hybridizationを行なった結果、left arm側約1.5kbにhybridizeするバンドが得られた。このfragmentに遺伝子発現に寄与するプロモーター配列が含まれるかどうか、現在検討中である。これらの成果の一部は本報告書に記載したとおり論文とした。また、他の一部についてはより詳細な検討を重ね、報告を行なう予定である。