転写調節因子制御によるHTLV-1感染細胞の増殖抑制

通过控制转录调节因子抑制 HTLV-1 感染细胞的增殖

• 批准号: 13771117
• 负责人: 神原 賢治
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771117/
• 关键词: HIV; antisenseRNA; MAT1; CAK; アンチセンス法; HTLV-1

ヒトレトロウイルス科に属するhuman immunodeficiency virus(以下HIV)は、感染した細胞においてはプロウイルスとして潜伏し、持続感染する。プロウイルスからのmRNAの転写は、HIVが持つTat蛋白質が必要でありTatなくしては安定的にmRNAを産生できない。TatはmRNAを転写する際において必須であるが、単独では働く事ができず、細胞内の種々の因子と協調して機能する。昨年、Tatと相互作用する因子であるMAT1蛋白質の遺伝子を取得し、MAT1発現を抑制するためにMAT1antisenseRNA発現ベクター構築を試みた。また、得られたベクターを用いMOLT4細胞に形質導入し、MAT1発現が抑制された細胞を得た。MAT1発現を抑制した細胞は、細胞増殖能が著しく抑制されていた。この細胞を用い、HIV持続感染細胞であるMOLT4/HIV細胞を用いcell-to-cell infectionを行った所、細胞の感染を抑制した。更にこの細胞の感染レセプター発現を調べた結果、HIV感染コレセプターであるCXCR4及びCCR5の発現に変化は見られなかったものの、メインレセプターであるCD4レセプターの発現が著しく低下していた。Cell-to-cell感染が抑制されていたのはこれが主たる原因であり、MAT1遺伝子を導入する事で、細胞のmRNAの合成に影響を与え、細胞増殖だけで無く、特定のレセプター発現が抑制される可能性がある事を示した。次に、HeLa細胞を用い、遺伝子導入試薬を用いMAT1antisense、sense、empty発現プラスミドと、HIV full-length molecular clone NL43とをコトランスフェクションした場合の、apoptosis誘導能を評価した。その結果、MAT1antisenseとコトランスフェクションした細胞において、有為にapoptosisを誘導した。この事から、MAT1発現を抑制した細胞へHIVが感染した場合、感染細胞特異的にapoptosisを誘導でき、HIVの変異に左右されずに、効果的に生体内からウイルスを又は感染細胞を除去できる可能性を示した。

The family belongs to the family human immunodeficiency virus (the following HIV), and the infected cells are infected with latent virus and infected virus. Please tell me that the Tat protein is necessary, that the Tat protein is stable, that the mRNA protein is stable. Tat mRNA notes that you must be responsible for all kinds of environmental pollution, only for each other, and for the coordination of several intracellular factors. Last year, the Tat interaction factor, the MAT1 protein gene, and the MAT1 protein were detected to inhibit the growth of the MAT1antisenseRNA protein. You can use the MOLT4 cell to restrain the cell input, and the MAT1 to suppress the cell input. The results of MAT1 showed that the inhibition of cell proliferation could be affected by the inhibition of cell proliferation. Use HIV to infect infected cells, use cell-to-cell infection to infect MOLT4/HIV cells, and infect cells to inhibit infection. The results showed that the infection rate of HIV infection was significantly higher than that of the control group (CXCR4) and that of CCR5 infection was significantly higher than that of the control group (P < 0.01). The Cell-to-cell infection suppresses the primary cause, the MAT1 infection causes the primary infection, the MAT1 infection induces the infection, the mRNA synthesizes the infection, the cell colonization is undetectable, and the specific gene inhibits the possibility of the infection. For the second time, the HeLa cell will be used, and the empty will be used in MAT1antisense, sense, and empty to show that there is no error in the system, and that the apoptosis will lead to the failure of the device. The results showed that there was a significant increase in the number of apoptosis cells, and that there was a significant difference between the two groups. In the event of infection, MAT1 has shown that it is possible to inhibit the combination of HIV infection, the apoptosis targeting of specific infection, the left and right of HIV infection, and the possibility of infection.