ヒト歯根膜組織におけるメカニカルストレスと非石灰化機構の関係解明

阐明人牙周膜组织机械应力与非矿化机制的关系

• 批准号: 13771308
• 负责人: 富田 浩一
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771308/
• 关键词: 歯根膜細胞; メカニカルストレス; 非石灰化

1.ヒト歯根膜細胞へのストレツチ力の負荷矯正学的理由で抜歯した小臼歯より無菌的に歯根膜を摘出し、その組織片を10%ウシ胎児血清を含むα-MEM(α-modified minium essential medium)培地にてタイプIコラーゲンコート培養デイシュであるFLEX-I(Flexercell社製)上で培養し、ストレッチ力負荷24時間前に1%ウシ胎児血清を含むα-MEMに交換し、Flexercell Strain Unit(Flexercell社製)を用いて、ヒト歯根膜細胞にストレッチ力を培養デイシュの膜が10%伸張する強さで48時間負荷した。2.ストレッチ負荷ヒト歯根膜細胞におけるmRNAの発現ストレッチ負荷したヒト歯根膜細胞におけるmRNAの発現を検討するため、負荷実験終了後、各々の培養細胞の全RNAをAGPC(Acid Guanidium-Phenol-Chloroform)法で抽出し、石灰化に関与するといわれているオステオカルシン(OC)、オステオネクチン(ON)、オステオポンチン(OP)、アルカリフォスファターゼ(ALP)と、非石灰化に関与しているといわれているマトリックスグラプロテイン(MGP)の各々に特異的なプライマーを使用してRT-PCR法を行った。RT-PCR終了後、2%アガロース電気泳動を行い、負荷をしなかった静置培養細胞との間における各々のmRNAの発現を比較した。その結果、どちらのヒト歯根膜細胞においても、ALP、ON、MGPのmRNAの発現がみられ、ALPmRNAの発現においてのみ、ストレッチ負荷したヒト歯根膜細胞においての発現が減弱していた。他のmRNAの発現の有意な差異はみられなかった。

1. The root membrane cells of the teeth were extracted from the root membrane of the teeth, and the tissue sections of the teeth were extracted from the root membrane of the teeth. The fetal serum contained α-MEM.(α-modified minimum essential medium) FLEX-I (Flexercell) was used for culture and stress load 24 hours before 1% fetal serum containing α-MEM exchange, Flexercell Strain Unit(Flexercell) was used for culture and stress load 48 hours before 10% membrane expansion. 2. mRNA expression in cultured root membrane cells under stress conditions. AGPC mRNA expression in cultured root membrane cells under stress conditions. AGPC mRNA expression in cultured root membrane cells under stress conditions.(Acid Guanidium-Phenol-Chloroform) method: extraction, ashing, separation (OC), separation (ON), separation (OP), separation (ALP) Non-liming is related to the use of RT-PCR in the treatment of various diseases. After RT-PCR termination, 2% of the mRNA expression was compared between the two groups. As a result, the mRNA expression of ALP, ON and MGP in the root membrane cells was reduced, and the mRNA expression of ALP was reduced. There are significant differences in the expression of mRNA.