歯周病原性細菌感染細胞のアポトーシス発現における膜小胞の役割

膜囊泡在牙周病原菌感染细胞凋亡表达中的作用

• 批准号: 13771310
• 负责人: 加藤 幸紀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771310/
• 关键词: A. actinomycetemcomitans; 膜小胞; ロイコトキシン; A.actinomycetemcomitans

平成13年度において,A. actinomycetemcomitansより産生される膜小胞には,A. actinomycetemcomitansの有する病原因子のひとつであるロイコトキシンが多く含有されていることが明らかになった。さらに,この膜小胞が宿主細胞へロイコトキシンを媒介する役割を担っている可能性を示した。そこで平成14年度では,膜小胞のヒト免疫細胞へおよぼす影響について検討を行った。本研究では,ヒト免疫細胞として樹立されたヒト骨髄性白血病細胞株であるHL60細胞を用いた。HL60細胞と膜小胞を反応させた後,抗膜小胞抗体を用いて免疫蛍光染色を行い,共焦点レーザー顕微鏡下で観察した。この結果,膜小胞がHL60細胞の細胞膜上に結合する所見が得られた。しかしロイコトキシンはHL60細胞に対して,早期に膜構造を溶解するため,ロイコトキシンを多く含有する膜小胞は,細胞膜に結合した後,すみやかに細胞を溶解してしまう可能性が考えられた。しかしながら,膜小胞添加と同時に抗膜小胞抗体を反応させた場合,あるいはロイコトキシンに対する阻害剤を添加したところ,細胞膜上に結合した膜小胞が観察された。加えて,ロイコトキシン遺伝子を欠落させた細菌株から産生された膜小胞は,HL60細胞と速やかに反応するが,細胞毒性を示さなかった。これらの結果から,膜小胞はロイコトキシンをHL60細胞(宿主免疫細胞)へ媒介するが,ロイコトキシンの存在とは関係なく細胞膜に結合することが明らかになった。

Heisei 13,A. Actinomycetemcomitans,A. Actinomycetemcomitans have pathogenic factors that can cause disease. In this paper, the membrane cell is used to demonstrate the possibility of host cell cloning. In the 14th year of Heisei, the influence of membrane cells on immune cells was discussed. In this study, we established a new leukemia cell line HL60. HL60 cells were stained with anti-membrane vesicle antibody and observed under microscope. As a result, membrane vesicles were found to bind to the cell membrane of HL60 cells. HL60 cells were dissolved in the early stages of cell membrane formation, and the cell membrane was dissolved in the early stages of cell membrane formation. When the membrane cell is added, the anti-membrane cell antibody is added, and the membrane cell is detected. In addition, the bacterial strain produced membrane vesicles, and the HL60 cell line was tested for cytotoxicity. As a result, the membrane vesicles are bound to the HL60 cells (host immune cells).

项目成果

Satsuki Kato, Yusuke Kowashi, Donald R.Demuth: "Outer membrane-like vesicles secreted by Actinobacillus actinomycetemcomitans are enriched in leukotoxin."Microbial Pathogenesis. 32. 1-13 (2002)

Satsuki Kato、Yusuke Kowashi、Donald R.Demuth：“伴放线放线杆菌分泌的外膜样囊泡富含白细胞毒素。”微生物发病机制。

S Kato, Y Kowashi, DR Demuth: "Outer membrane-like vesicles secreted by Actinobacillus actinomycetemcomitans are enriched in leukotoxin"Microbial Pathigenesis. 32. 1-13 (2002)

S Kato、Y Kowashi、DR Demuth：“伴放线放线杆菌分泌的外膜样囊泡富含白细胞毒素”微生物发病机制。

DR Demuth, D James, Y Kowashi, S Kato: "Interaction of Actinobacillus actinomycetemcomitans outer membrane vesicles with HL60 cells does not require leukotoxin"Cellular Microbiology. 5. 111-121 (2003)

Demuth 博士、D James、Y Kowashi、S Kato：“Actinobacillus actinomycetemcomitans 外膜囊泡与 HL60 细胞的相互作用不需要白细胞毒素”细胞微生物学。