放射能の核移行を目的としたタンパク質標識試薬の開発

放射性核转位蛋白质标记试剂的开发

• 批准号: 13771409
• 负责人: 上原 知也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771409/
• 关键词: 内用放射線治療; 核移行性ペプチド; 蛋白質標識薬剤; リソソーム代謝; 放射性医薬品; 核移行性; 代謝

近年,核移行性ペプチドと膜を通過しない蛋白質を結合させた融合蛋白質が,細胞膜を通過することが報告された.しかし,抗腫瘍抗体フラグメント等の標的指向性の蛋白質と核移行性ペプチドをそのまま結合させただけでは,核移行性ペプチドの性質による非特異的な組織への集積が増えることが示されている.そこで本課題では,核移行性ペプチドに塩基性アミノ酸が多数含まれていることに注目し,ペプチド全体の塩基性を減弱させるために酸性アミノ酸を繋げることにより非特異的な細胞浸潤を抑え,細胞に取り込まれた後,細胞内代謝により塩基性アミノ酸配列のみを遊離するペプチドの設計を行った.これにより細胞外では母体蛋白質の動態を,細胞内では核移行性ペプチドの動態を持つ試薬が出来ると考えた.核移行性の塩基性アミノ酸部位としてリソソーム代謝に安定なD体アミノ酸を基本とし,膜透過と核移行が知られている(D-Arg)_7を選択した.また酸性アミノ酸として強酸性のスルホニル基を有する[Tyr(SO_3H)]を選択し,モデルペプチドとしてAc-[Tyr(SO_3H)]_4-Gly-Lys-Gly-Tyr-(D-Arg)_7-Lys(FITC)-CONH_2を設計,合成した.本モデルペプチドを用いて(D-Aeg)_7の塩基性を[Tyr(SO_3H)]_4により減弱させたことによる膜透過に及ぼす影響を検討した.細胞への取り込みを検討したところ,強酸性基を有するTyr(SO_3H)があるにも関わらず,細胞への取り込みが観察された.又この取り込みは低温下でも低下しなかったことから,(D-Arg)_7の膜透過性が維持されていると考えられた.本結果は,核移行部位である(D-Arg)_7の作用は強力でありその作用を打ち消すためには更なる酸性基の導入が必要と考えられた.さらにその作用の強さ故に血液循環中はその作用をマスクするという本研究方針は有用であると考えられる.

In recent years, nuclear migration has been reported in the passage of proteins through cell membranes. Anti-tumor antibodies, such as anti-tumor antibodies, target directional protein and nuclear migration protein binding, nuclear migration protein binding, nuclear migration protein properties, non-specific tissue accumulation increased. The present study aims to design a method for the reduction of nuclear migration, the inhibition of nonspecific cellular infiltration, and the elimination of intracellular metabolism. This is a study of the extracellular dynamics of the parent protein, and the intracellular dynamics of the nuclear transition. The basic structure of nuclear migration and the basic structure of nuclear migration. The acid group [Tyr(SO_3H)] was selected from the acid group [Tyr(SO_3H)] and the acid group [Tyr (SO_3H)] was designed and synthesized from Ac-[Tyr(SO_3H)]_4-Gly-Lys-Gly-Tyr-(D-Arg)_7-Lys(FITC)-CONH_2. This paper discusses the influence of membrane transmission and diffusion on the basic properties of (D-Aeg)_7 and [Tyr(SO_3H)]_4. The strong acid group Tyr(SO_3H) was detected in the cell. The membrane permeability of (D-Arg)_7 is maintained at low temperature. The results showed that the effect of D-Arg on nuclear transition site was strong and the introduction of acid radical was necessary. This research policy is useful because of its strong role in blood circulation.

项目成果

M.Sato, T.Toyozaki, K.Odaka, T.Uehara, et al.: "Detection of Experimental Autoimmune Myocarditis in Rats By ^<111>In Monoclonal Antibody Specific for Tenascin-C"Circulation. 106・11. 1397-1402 (2002)

M.Sato、T.Toyozaki、K.Odaka、T.Uehara 等人：“通过 ^<111>Tenascin-C 特异性单克隆抗体检测大鼠实验性自身免疫性心肌炎”循环。 1402 (2002)

T.Mukai, Shinji Namba, Y.Arano, M.Ono, Y.Fujioka, T.Uehara, et al.: "Synthesis and evaluation of a monoreactive DOTA derivative for indium-111-based residualizing label to estimate protein pharmacokinetics"J. Pharm. Pharmacol.. 54・8. 1073-1081 (2002)

T.Mukai、Shinji Namba、Y.Arano、M.Ono、Y.Fujioka、T.Uehara 等人：“用于基于 Indium-111 的残留标记的单反应 DOTA 衍生物的合成和评估，以估计蛋白质药代动力学”J药学.. 1073-1081 (2002)

T.Uehara et al.: "In vivo Recognition of Cyclopentadienyltricarbonyl Rhenium (CpTR) derivatives"Nucl Med, Biol.. (in press).

T.Uehara 等人：“环戊二烯基三羰基铼 (CpTR) 衍生物的体内识别”Nucl Med，Biol..（出版中）。