カルシウム結合蛋白質ALG-2を介するアポトーシス制御機構の研究

钙结合蛋白ALG-2介导的细胞凋亡调控机制研究

• 批准号: 13780569
• 负责人: 柴田 秀樹
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780569/
• 关键词: カルシウム結合蛋白質; アポトーシス; 細胞内シグナル伝達; 細胞生物学; 分子生物学

本研究は、細胞内Ca^<2+>センサーとしてのALG-2(apoptosis linked-gene 2)の作用点を明らかにすることで、アポトーシスの細胞内シグナル伝達機構を解明することを目的としている。研究計画に沿い、ALG-2をbaitとした酵母Two-Hybrid法を用いた結合因子の探索をおこない、エンドネキシン型Ca^<2+>結合蛋白質であるAnnexin XIのアミノ末端領域に、ALG-2が結合することを示し、昨年度、報告した。本年度はさらに、Annexin XIのアミノ末端領域のアミノ酸組成がAnnexin VIIのアミノ末端領域の組成と類似していることから、ALG-2とAnnexin VIIのアミノ末端領域の結合を検討し、報告した。ALG-2は、Annexin XIと同様に、Ca^<2+>依存的にAnnexin VIIのアミノ末端制御領域と直接、結合した。さらに、SPRバイオセンサーによりALG-2とAnnexin VII、XIの結合を速度論的に解析したところ、それぞれのアミノ末端領域にALG-2と親和性の高い領域と低い領域が存在することを示唆する結果を得た。これらAnnexinのALG-2結合に関与する領域と、すでに我々が同定しているALG-2のCa^<2+>依存的相互作用因子であるAlixのALG-2結合領域のアミノ酸組成は類似していることから、ALG-2は共通した結合モチーフを認識している可能性がある。一方で、Alixをbaitとした酵母Two-Hybrid法による結合因子の探索をおこない、細胞の増殖、生存シグナル伝達関連因子や小胞輸送関連因子などを侯補因子として得た。すでに、結合領域の同定を含めた詳細な解析をすすめており、ALG-2とAlixが協調して複数の細胞内シグナルの伝達バランスを調節している可能性を見出しており、今後の発展が期待される。

This study は, intracellular Ca ^ 2 + > < セ ン サ ー と し て の ALG - 2 (apoptosis linked - gene 2) の point を Ming ら か に す る こ と で, ア ポ ト ー シ ス の intracellular シ グ ナ ル 伝 of institutions を interpret す る こ と を purpose と し て い る. Research projects に along い, ALG - 2 を bait と し た yeast Two Hybrid method を with い た combining with the exploration を factor の お こ な い, エ ン ド ネ キ シ ン type Ca ^ 2 + > < binding protein で あ る Annexin XI の ア ミ ノ end に, ALG - 2 が combining す る こ と を し, last year, the report し た. This year は さ ら に, Annexin XI の ア ミ ノ end field の ア ミ ノ acid composition が Annexin VII の ア ミ ノ areas at the end of の と similar し て い る こ と か ら, ALG - 2 と Annexin VII の ア ミ ノ の end field combining を beg し 検, report し た. ALG-2, Annexin XIと are the same as に, Ca^<2+> dependent にAnnexin VII ア ノ ノ terminal control domain と direct, combined た. さ ら に, SPR バ イ オ セ ン サ ー に よ り ALG - 2 と Annexin VII, XI の を speed theory analytical し に た と こ ろ, そ れ ぞ れ の ア ミ ノ end field に ALG - 2 と affinity の high in low と い い が exist す る こ と を in stopping す た を る results. こ れ ら Annexin の ALG - 2 combined に masato and す る と, す で に I 々 が with fixed し て い る ALG - 2 の Ca ^ 2 + > < dependent interaction factor で あ る Alix の ALG - 2 combined with field の ア ミ ノ acid composition は similar し て い る こ と か ら, ALG - 2 common は し た combining モ チ ー フ を know し て い る Possibility がある. Party で, Alix を bait と し た yeast Two Hybrid method に よ る combining with the exploration を factor の お こ な い, cell の raised colonization, survival シ グ ナ ル 伝 of masato even factor や vesicular transport masato even factor な ど を hou fill factor と し て た. す で に, combined with field の with を containing め た detailed analytical を な す す め て お り, ALG - 2 と Alix が coordination し て plural の intracellular シ グ ナ ル の 伝 da バ ラ ン ス を adjust し て い る を likely see a し て お り, future の 発 exhibition が expect さ れ る.

项目成果

Masatoshi Maki et al.: "Structures, functions and molecular evolution of the penta-EF-hand Ca^<2+>-binding proteins"Biochimica et Biophysica Acta. 1600. 51-60 (2002)

Masatoshi Maki 等：“五-EF-手Ca ^ 2 -结合蛋白的结构、功能和分子进化”Biochimica et Biophysicala Acta。

Hirokazu Satouh et al.: "ALG-2 Interacts with the Amino-terminal Domain of Annexin Xl in a Ca^(2+)-Dependent Manner"Biochemical and Biophysical Research Communications. (印刷中).

Hirokazu Satouh 等人：“ALG-2 以 Ca^(2+) 依赖性方式与膜联蛋白 Xl 的氨基末端结构域相互作用”生物化学和生物物理研究通讯（正在出版）。