权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

カルシウム結合蛋白質を介するリソソーム膜の損傷応答機構の分子基盤解明

阐明钙结合蛋白介导的溶酶体膜损伤反应机制的分子基础

基本信息

批准号：
22H02302
负责人：
柴田秀樹
金额：
$ 11.32万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02302/
关键词：
リソソームカルシウム結合蛋白質 ESCRT カルシウム

项目摘要

リソソームは細胞内消化を担う膜で覆われた細胞小器官である。限界膜が損傷したリソソームからは、加水分解酵素や水素イオン、カルシウムイオンなどが漏出する。研究代表者らは、損傷したリソソームにカルシウム結合蛋白質ALG-2が動員される現象を見出しており、リソソームの損傷を誘発した細胞においてALG-2の近傍に存在する蛋白質を同定している。本年度は、その中でLIP5に着目し以下を解析した。(1) LIP5の免疫染色実験により、LIP5がリソソーム損傷を誘導した細胞でリソソームに動員されることを観察した。LIP5のリソソーム動員におけるカルシウムイオンの役割を明らかにする目的で、カルシウムキレータであるBAPTA-AMを処理したところ、LIP5のリソソーム動員が抑制された。一方、ALG-2のノックアウト細胞でもリソソーム損傷刺激後のLIP5のリソソーム局在が観察された。(2) LIP5の発現抑制がその相互作用蛋白質であるVPS4A/Bの損傷リソソームへの局在に与える影響を解析した。VPS4A/Bはリソソーム損傷刺激を加えた細胞においてリソソームに局在したが、LIP5を発現抑制するとリソソーム局在が観察されなかった。(3)LIP5発現抑制細胞のリソソーム損傷刺激後の細胞死誘導に関して、ウエスタンブロット解析により発現抑制していない細胞と比較した。その結果、LIP5の発現抑制細胞はリソソーム損傷刺激後にカスパーゼ3/7の基質蛋白質の切断断片が多く検出され、アポトーシスが誘導されていると考えられた。

The cells are covered with small organs. Limit membrane damage to the solution, hydrolysis enzyme and water element, the solution to the leakage The researchers showed that the protein ALG-2 was mobilized in cells after injury, and that ALG-2 was present in the vicinity of ALG-2. This year's LIP5 was analyzed below. (1)Immunostaining for LIP5 was carried out and LIP5 was detected in cells that were induced to damage. LIP5's soft drivers are controlled by BAPTA-AM, which is processed in the following ways: A prescription, ALG-2 and its use in cell damage stimulation after the LIP5 and its use in cell damage detection (2)Analysis of the role of LIP5 in the development and interaction of VPS4A/B VPS4A/B is a good candidate for cell injury and inhibition. (3) LIP5 expression inhibits cell apoptosis induced by cellular injury, and its expression inhibits cell apoptosis induced by cellular injury induced by cellular injury. As a result, the expression of LIP5 was inhibited by the expression of matrix protein fragments in response to a variety of injury stimuli.