半生インフルエンザウイルスベクターの開発

半活流感病毒载体的研制

• 批准号: 13877044
• 负责人: 河岡 義裕
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877044/
• 关键词: インフルエンザウイルス; リバース・ジェネティクス; 変異ウイルス; ワクチン; NS2

申請者らが開発したリバースジェネティクス法を用いて、安全性の高い不活化ワクチンと、侵入門戸の感染防御に有効な弱毒化生ワクチン双方の長所を兼ね備えたワクチン、すなわち細胞に一度だけ感染してウイルス蛋白質を発現し、粘膜免疫および細胞性免疫は誘導するが新たな感染性粒子は産生しない、"半生"ワクチンの開発を試みた。本研究では、インフルエンザウイルスの8本のRNA分節のうち、NS遺伝子に着目した。NS遺伝子がコードするNS2蛋白質を発現しないように変異を導入し、これを用いてNS2欠損ウイルスを作製した。NS2欠損ウイルスを培養細胞に感染させると、主要ウイルス抗原蛋白質であるNP, HA, NA, M1の発現は確認されたが、新たな感染性ウイルス粒子の産生は認められなかった。このウイルスをワクチンとして、3週間おきに3回マウスに経鼻接種して、血中と鼻腔および肺洗浄液中の抗体価を調べたところ、血中からはIgG抗体が、肺洗浄液中からはIgA抗体が検出された。続いて最終免疫から1ヶ月後あるいは3ヶ月後に、致死量の100倍のウイルスでマウスを攻撃した。最終免疫から1ヵ月後に攻撃した場合、対照群のマウスは全て死亡したのに対し、半生ワクチン接種マウスは全て生残した。さらに、最終免疫から3ヵ月後に攻撃した場合でも、半生ワクチン接種マウスは9匹中8匹が生残した。以上の結果は、増殖能を欠く"半生"ワクチンは、弱毒生ワクチンで危慎されるような病原性復帰の可能性はなく、安全面でも優れたワクチン侯補になることを示している。

Applicants ら が open 発 し た リ バ ー ス ジ ェ ネ テ ィ ク を ス method with い て, high security の い activation ワ ク チ ン と of, or intrusion into, a door opens の infection defense に unseen な weak poison born ワ ク チ ン の long を and ね prepared by both sides え た ワ ク チ ン, す な わ ち cells に once だ け infection し て ウ イ ル ス protein を 発 し, mucosal immunity お よ び cell immunity は induction Youdaoplaceholder0 new たな infectious particles するが generate な な するが, "half-life "ワ ワ チ チ を みた develop を test みた. This study で は, イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の section 8 this の RNA の う ち, NS but 伝 に with mesh し た. NS posthumous son 伝 が コ ー ド す る NS2 protein を 発 now し な い よ う に - different を import し, こ れ を with い て NS2 owe loss ウ イ ル ス を cropping し た. NS2 owe loss ウ イ ル ス を culture cell に infection さ せ る と, main ウ イ ル ス antigen protein で あ る NP, HA, NA, M1 の 発 は now confirmed さ れ た が, new た な infectious ウ イ ル の ス particles to produce は recognize め ら れ な か っ た. こ の ウ イ ル ス を ワ ク チ ン と し て, 3 weeks お き に 3 back マ ウ ス に 経 nasal vaccination し て, blood と nasal お よ び の antibody in lung fluid at 価 を adjustable べ た と こ ろ, blood か ら は IgG antibody が incorporated, lung fluid か ら は IgA antibodies が 検 out さ れ た. 続 い て eventually immune か ら ヶ 1 month after あ る い ヶ three months after は に, lethal dose の 100 times の ウ イ ル ス で マ ウ ス を tapping shock し た. Eventually immune か ら ヵ 1 month after attack に shock し た occasions, according to the group of seaborne の マ ウ ス は て all death し た の に し seaborne, half ワ ク チ ン vaccination マ ウ ス は て born all residual し た. さ ら に, final immune か ら ヵ three months after attack に shock し た occasions で も, half ワ ク チ ン vaccination マ ウ ス は born nine in 8 horse が residual し た. の results は, raised above can yield を owe く "half" ワ ク チ ン は, weak poison born ワ ク チ ン で wei shen さ れ る よ う な pathogenicity after 帰 の possibility は な く, AnQuanMian で も optimal れ た ワ ク チ ン our waiting に な る こ と を shown し て い る.

项目成果

Watanabe T, Watanabe S, Neumann G, Kida H, Kawaoka Y: "Immunogenicity and protective efficacy of replication-incompetent influenza virus-like particles"Journal of Virology. 76. 767-773 (2002)

Watanabe T、Watanabe S、Neumann G、Kida H、Kawaoka Y：“复制无能流感病毒样颗粒的免疫原性和保护功效”病毒学杂志。