S.mutansにおけるスクロース依存性付着機構の分子生物学的解明

变形链球菌蔗糖依赖性附着机制的分子生物学阐明

基本信息

批准号：
13877352
负责人：
祖父江鎮雄
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

S.mutans MT8148株の各gtf遺伝子を大腸菌に発現させたリコンビナントGTF(rGTF)と,GTFをコードする遺伝子に抗生物質耐性遺伝子を挿入させることにより作成した7種のGTF欠失変異株を用いて,in vitroにおいてS.mutans静止菌体のスクロース依存性平滑面付着の再構築を試み,以下の結果を得た.1.各GTF欠失変異株における静止菌体のスクロース依存性平滑面付着は,親株に比べ,有意に低下した.2.各GTF欠失変異株に欠失GTFに対応するrGTFを加えると,スクロース依存性付着は親株と同程度まで回復した.3.すべてのGTFを欠失変異株を平滑面に付着させるには,すべてのGTFが必要で,最も強固な付着を獲得したのは,15mUのGTFB,0.75mUのGTFC,3mUのGTFDを添加した時であった.4.rGTFFの合成する不溶性グルカンの付着能は,反応液中にrGTFBが30mU, rGTFCが1.5mU, rGTFDが6mU存在するとき最大であった.5.不溶性グルカンの付着にはGTFCとGTFDが重要な役割を果たしており,rGTFCとrGTFDが1:4で存在するとGTFBが無くても,不溶性グルカンの平滑面への付着が認められた.以上の結果は,S. mutans菌体の平滑面付着には3種のGTFがすべて必要であり,その活性比率も重要な役割を果たすことを明らかにしている.

Using recombinant GTF (rGTF) in which each gtf gene of S. mutans MT8148 is expressed in E. coli, and seven GTF deletion mutants created by inserting an antibiotic resistance gene into the gene encoding GTF, we have used the following: We attempted to reconstruct the sucrose-dependent smooth surface attachment of S. mutans resting cells in vitro, and obtained the following results: 1。与母体菌株相比，每个GTF缺失突变体中静态细胞的蔗糖平滑表面附着均显着降低。 2。当将与缺失GTF相对应的RGTF添加到每个GTF缺失突变体中时，将蔗糖依赖性附件恢复到与父菌株相同的水平。 3。所有GTF都需要将所有GTF连接到光滑的表面，并且当添加15 mu GTFB，0.75 MU GTFC和3个MU GTFD时，达到了最强的附件。 4。由RGTFF合成的不溶性葡萄糖为30 mu。最大值是在1.5mU中存在RGTFC，而RGTFD在6MU中存在。5。 GTFC和GTFD在不溶性葡聚糖的附着中起着重要作用，当RGTFC和RGTFD在1：4中存在时，即使没有GTFB，也会观察到不溶性葡萄糖的附着在光滑表面上。上述结果表明，所有三个GTF都是链球菌细胞平滑表面附着所必需的，其活性比也起着重要作用。