突然変異マウスを用いたmi転写因子のマスト細胞における転写調節機構の解析

利用突变小鼠分析肥大细胞mi转录因子的转录调控机制

• 批准号: 13770107
• 负责人: 森井 英一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770107/
• 关键词: マスト細胞; MITF; SCF; KIT; 突然変異マウス; 分化; 表現型

mi遺伝子座がコードする転写因子MITFはマスト細胞分化に重要であることを我々はこれまで報告した。MITFに異常をきたしたmi/miマウスでは皮膚マスト細胞の数が3分の1に減少する。この原因としてマスト細胞の最も重要な増殖因子であるstem cell factor(SCF)のレセプターであるKITの発現がmi/miマウスの皮膚マスト細胞で低下することがあげられる。これまで用いたmi/miマウスは、C57BL/6系統であった(B6-mi/mi)が、今回、我々は戻し交配を行い、WBを遺伝学的背景とするmi/miマウスを作成した(WB-mi/mi)。このWB-mi/miマウスではB6-mi/miマウスと異なり、皮膚マスト細胞数の減少がみられなかった。しかし、B6-mi/miマウス由来マスト細胞と同様、WB-mi/miマウス由来マスト細胞でもKITの発現が低下していた。このことは、KITの発現低下にも関わらず、皮膚マスト細胞の数を維持する何らかの因子がWB-mi/miマウスでは存在することを示す。そこでマッピングを行ったところ、ゲノム上のSCFをコードする領域近傍にこの因子が存在することがわかった。SCF蛋白の配列をB6系統とWB系統のマウスで比較したが有意な差はなかった。SCFには膜結合型と可溶型の2種類の蛋白があるが、後者の方が皮膚マスト細胞数に重要であることが報告されている。SCFmRNAにはalternative spliceによりlong form(SCF-L)とshort form (SCF-S)の2種類がある。可溶型SCFはSCF-LmRNAからの方が産生されやすい。そこで、B6系統とWB系統のマウスの皮膚におけるSCF-LとSCF-Sの量比を検討したところ、WB系統でSCF-L/SCF-S比が有意に高かった。以上のことより、WB系統のマウスではマスト細胞の数を増加させるSCFの量がB6系統のマウスよりも多く、そのためにKITの発現量の低下にもかかわらずマスト細胞の減少が認められなかったことが示唆された。

Mi heritage 伝 stroma が コ ー ド す る planning write factor MITF は マ ス ト cell differentiation に important で あ る こ と を I 々 は こ れ ま で report し た. Abnormal MITF に を き た し た mi/mi マ ウ ス で は skin マ ス ト が three の 1 に の of cells to reduce す る. こ の reason と し て マ ス ト cell の も most important な raised colonization factor で あ る stem cell factor (SCF) の レ セ プ タ ー で あ る KIT の 発 が mi/mi マ ウ ス の skin マ ス ト low cell で す る こ と が あ げ ら れ る. こ れ ま で with い た mi/mi マ ウ ス は, C57BL / 6 system で あ っ た (B6 - mi/mi) が, now back, I 々 は 戻 し mating を い, WB を heritage 伝 study background と す る mi/mi マ ウ ス を made し た (WB - mi/mi). こ の WB - mi/mi マ ウ ス で は B6 - mi/mi マ ウ ス と different な り, skin マ ス ト cell number の reduce が み ら れ な か っ た. し か し, B6 - mi/mi マ ウ ス origin マ ス と ト cells with others, WB - mi/mi マ ウ ス origin マ ス ト cells で も KIT の 発 now low が し て い た. こ の こ と は, KIT の 発 now low に も masato わ ら ず, skin マ ス ト を の of cells maintain す る what ら か の factor が WB - mi/mi マ ウ ス で は exist す る こ と を す. そ こ で マ ッ ピ ン グ を line っ た と こ ろ, ゲ ノ ム の on SCF を コ ー ド す る field near alongside に こ の factors が す る こ と が わ か っ た. The comparison of the をB6 system and the とWB system of the SCF protein <s:1> ウスで shows that the <s:1> たが intentional な is inferior to the <s:1> な な った った った った った った った った った った った. SCF に は type membrane bound と soluble の 2 kinds の protein が あ る が, the latter の が skin マ ス ト cell number に important で あ る こ と が report さ れ て い る. SCFmRNAに に alternative spliceによ によ long form(SCF-L)とshort form(SCF-S) two types がある. Soluble SCF scF-l mrna ら ら が produces されやす ら from が. そ こ で, B6 system と WB system の マ ウ ス の skin に お け る SCF -l と SCF -s の than を beg し 検 た と こ ろ, WB system で SCF - L/SCF - S higher than が intentionally に か っ た. Above の こ と よ り, WB system の マ ウ ス で は マ ス ト を raised の of cells with さ せ る SCF の が B6 system の マ ウ ス よ り も く, そ の た め に KIT の 発 low amount is の に も か か わ ら ず マ ス の reduce が ト cells to recognize め ら れ な か っ た こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Morii E. et al.: "Effect of MITF on transcription of transmembrane tryptast gene in cultured mast cells of mice"Bilchem.Biophys.Res.Comm.. 289. 1247-1256 (2001)

Morii E.等：“MITF对小鼠培养肥大细胞中跨膜类胰蛋白酶基因转录的影响”Bilchem.Biophys.Res.Comm..289.1247-1256(2001)

Morii E. et al.: "Importance of leucine zipper domain of for differentiation of mast cells demonstrated using mice/mice mice"Blood. 97. 2038-2044 (2001)

Morii E.等人：“使用小鼠/小鼠证明了亮氨酸拉链结构域对于肥大细胞分化的重要性”血液。

Nishida K. et al.: "Requirement of Gab2 for mast cell development and Kitl/Kit signalling"Blood. (in press).

Nishida K.等人：“Gab2对于肥大细胞发育和Kit1/Kit信号传导的要求”血液。

Nishida K et al.: "Requirement of Gab2 for mast cell development and kitL/c-kit signaling"Blood. 99. 1866-1869 (2002)

Nishida K 等人：“肥大细胞发育和 kitL/c-kit 信号传导对 Gab2 的要求”血液。

Oboki K et al.: "Isoforms of mi transcription fecter preferentially expressed in cultured mast cells of mice"Biochem.Biophys.Res.Comm. 290. 1250-1254 (2002)

Oboki K 等人：“mi 转录因子的亚型优先在培养的小鼠肥大细胞中表达”Biochem.Biophys.Res.Comm。