平面内細胞極性の形成:7回膜貫通型カドヘリンが制御するシグナル伝達機構の解析
细胞平面极性的形成:七种跨膜钙粘蛋白调控的信号转导机制分析
基本信息
- 批准号:02J02022
- 负责人:
- 金额:$ 1.92万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
多くの上皮細胞は、頂部基部軸に沿った極性の他に、それとは直交する平面内に第2の極性・平面内細胞極性(planar cell polarity, PCP)を発達させる。ショウジョウバエの翅表皮においては、個々の細胞の遠位端にアクチン線維が集合し、一本の翅毛を形成する。翅毛は常に遠位側に向かって伸長する。PCP制御分子群に属する7回膜貫通型レセプターFrizzled(Fz)およびFlamingo(Fmi)は、翅毛形成に先立って、細胞の遠近軸方向の境界に一過的に分布する。いくつかの実験結果から、これらの偏りがPCPに重要であることが示唆されていた。そこで、我々は、これらの極性制御分子群の偏りが生み出される機構を探るために、GFP融合タンパク質Fz::GFPを生細胞で可視化し、particle様シグナルの挙動を経時観察した。興味深いことに、Fz::GFP particleは、Fzが遠位側境界に偏り始める時期特異的に、遠位側境界に偏って移動することがわかった。次に、Fz::GFPの極性輸送を駆動する細胞内装置を探す目的で、透過型電子顕微鏡を用いた解析を行った。翅表面に水平な方向で超薄切片を作製したところ、接着構造(adherens junction, AJ)を含む平面に微小管構造が顕著に観察された。さらに、その微小管の配向が遠近軸方向に偏っていたことから、Fz::GFP particleが微小管に沿って遠位側境界に偏って運ばれるのではないかと予想された。この仮説を支持する結果として、免疫電顕においてFmiシグナルを含む脂質2重膜小胞が微小管に接している像が観察された。さらに、薬剤によって微小管を破壊したところ、FzやFmiの細胞内分布は顕著に乱され、翅毛の一部は細胞の中央で形成された。この表現型は、FzやFmi機能喪失細胞とほぼ同じであった。以上の結果から、遠近軸に沿った微小管ネットワークが、FzやFmiの細胞内分布を制御することでPCP形成に寄与することが強く示唆された。
Many epithelial cell develop polar polarity (PCP) along the apical basal axis, and polar polarity (PCP) in the second plane. The cells in the distal end of each cell are assembled together to form a single wing hair. The wing hairs are usually elongated distally. PCP control molecule group belongs to 7-loop membrane-penetrating type Frizzled(Fz) and Flamingo(Fmi), and wing hair formation occurs in advance, and the distribution of PCP control molecule group in the distal and distal axial directions of the cell is one-way. The result of the experiment is that the PCP is important. For example, we can detect the molecular structure of GFP fusion protein Fz::GFP cells, and detect the molecular structure of GFP fusion protein Fz: GFP cells. Fz::GFP particle Next, Fz: GFP polar transport to move intracellular devices to explore the purpose, transmission electron microscopy to use the analysis Ultrathin sections of the fin surface in the horizontal direction were prepared, and adherens junctions (AJ) were observed. The alignment of the micro-tubes along the far and near axis is different from that of the GFP particles along the far side. These results support the observation of the presence of lipid 2-heavy membrane vesicles in the immune system. The cellular distribution of Fz and Fmi in the microtubule is mainly composed of the central part of the wing hair. The phenotype of Fz and Fmi loss cells is similar to that of Fz and Fmi. The results show that the intracellular distribution of Fz and Fmi along the proximal and distal axes is controlled by PCP.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
島田裕子, 碓井理夫, 上村匡: "平面内細胞極性形成の不思議"実験医学 2003年 3月号. Vol.21No.4. 452-459 (2003)
Yuko Shimada、Rio Usui、Tadashi Uemura:“平面内细胞极性形成之谜”实验医学 2003 年 3 月第 21 期第 452-459 期(2003 年)。
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- 通讯作者:
Tadashi Uemura, Yuko Shimada: "Breaking Cellular Symmetry along Planar Axes in Drosophila and Vertebrates"Journal of Biochemistry(日本生化学会誌). 134. 625-630 (2003)
Tadashi Uemura、Yuko Shimada:“打破果蝇和脊椎动物中平面轴的细胞对称性”生物化学杂志 134. 625-630 (2003)。
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