隔膜形成体の構築に関わる新規の細胞骨格関連タンパク質の検索

寻找参与成膜体构建的新型细胞骨架相关蛋白

• 批准号: 02J02240
• 负责人: 五十嵐 久子
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: University of Hyogo (2004)Himeji Institute of Technology (2002-2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J02240/
• 关键词: アクチン; 微小管; 細胞骨格; 隔膜形成体; アクチン繊維; 微小管結合タンパク質

植物細胞は、赤道面の隔膜形成体と呼ばれる構造内で細胞板が合成されることにより細胞質分裂が終了する。微小管は細胞の分裂面に極性のそろった状態で規則正しく配列し、細胞板の発達とともに、同心円状に広がる。細胞板の材料となる小胞は、微小管に沿って細胞の赤道面に運ばれる。このような、隔膜形成体におけるダイナミックな微小管の構造変化や小胞の輸送には、多くの制御蛋白質が関与していると考えらる。近年、隔膜形成体に局在する微小管関連タンパク質がいくつも同定され、その重要性が示唆されているが、隔膜形成体の分子機構の全容を解明するためには十分ではない。そこで、本研究では、隔膜形成体の構築に関わる未同定のタンパク質を検索することを目的とし以下の実験を行った。高度に細胞周期を同調できるタバコ培養細胞BY-2を用い、隔膜形成体の細胞骨格成分単離を試みた。培養7日目の細胞は、アフィデコリンとプロピザマイドにより、細胞分裂終期に同調した。その後、酵素処理により細胞壁を消化し、パーコールを用いた密度勾配遠心分離を用い、隔膜形成体の細胞骨格成分と核を分離した。単離した隔膜形成体の細胞骨格成分を2次元電気泳動で分離し、間期の細胞成分と比較したところ、明らかな違いが見られた。質量分析により分析したが新規のタンパク質を同定するに至らなかった。上記の研究と平行して間期の細胞からの微小管結合タンパク質の分離とその局在を調べた。その結果、195kDaの微小管結合タンパク質の単離に成功した。質量分析によりタンパク質の同定を行ったところ未同定のタンパク質であることが明らかになった。抗体を作製し、その分布を観察したところ、隔膜形成体や核内に局在していることが明らかになった。

Plant cell membrane formation on equatorial plane is composed of cell plate and cytoplasmic division. The microtubule is arranged regularly in the polar state of the cell division surface, and the cell plate is arranged concentrically. The material of the cell plate is transported along the equatorial plane of the cell. The structure of the membrane forming body changes and the transport of small cells changes. In recent years, the importance of membrane formation has been demonstrated in the development of microtube-related substances, and the full content of molecular mechanisms of membrane formation has been clarified. The purpose of this study is to develop a new type of membrane forming system. High cell cycle synchronization, cell culture BY-2, cell membrane formation and cell skeleton composition isolation The cells were cultured for 7 days, and the homology of cell division was determined. After the enzyme treatment, the cell wall is digested, the cell density is matched, and the cell skeleton component is separated. The cellular components of the membrane forming body are separated by two-dimensional electrical mobility, and the cellular components of the membrane forming body are compared with each other. Quality analysis and quality control The study of parallel intercellular separation of microtubules and microcellular separation of microtubules is described above. The results showed that the 195kDa microtube binding was successful. Quality analysis is the same as quality analysis. The distribution of antibodies in the nucleus is observed.

项目成果

Andrei Smertenko Noriban Saleh, Hisako Igarashi, Hitoshi Mori, Isolde Hauser-Halm, Chang-Jie Jiang, Seiji Sonobe, Clive W.Lloyde, Patrick J.Hussey: "A new class of microtubule-associated proteins in plants"Nature Cell Biology. 2. 750-753 (2000)

Andrei Smertenko Noriban Saleh、Hisako Igarashi、Hitoshi Mori、Isolde Hauser-Halm、Chang-Jie Jiang、Seiji Sonobe、Clive W.Lloyde、Patrick J.Hussey：“植物中一类新的微管相关蛋白”《自然细胞生物学》。

Andrei Smertenko, Norihan Saleh, Hisako Igarashi, Hitoshi Mori, Isolde Hauser-Hahn, Chang-Jiang Jiang, Seiji Sonobe, Clive W.Lloyde, Patrick J.Hussey: "A new class of microtubule-associated proteins in plants."Nature Cell Biology. 2. 750-753 (2000)

Andrei Smertenko、Norihan Saleh、Hisako Igarashi、Hitoshi Mori、Isolde Hauser-Hahn、Chang-Jiang Jiang、Seiji Sonobe、Clive W.Lloyde、Patrick J.Hussey：“植物中一类新的微管相关蛋白。”Nature Cell

Isolation of a novel 190 kDa protein from tobacco BY-2 cells: Possible involvement in the interaction between actin filaments and microtubules

• DOI: 10.1093/pcp/pcd015
• 发表时间: 2000-08-01
• 期刊: PLANT AND CELL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.9
• 作者: Igarashi, H;Orii, H;Sonobe, S
• 通讯作者: Sonobe, S

Plant microtubules can translocated by dynein ATPase from sea urchin in vitro.

植物微管可以在体外通过海胆动力蛋白 ATP 酶进行易位。

• 发表时间: 1995
• 期刊: Plant and Cell Physiology 36
• 作者: Etuo Yokota;Seiji Sonobe;Hisako Igarashi;Teruo Shimmen
• 通讯作者: Teruo Shimmen

Patrick J.Hussey, Timothy J.Hawkins, Hisako Igarashi, Despina Kaloriti, Andrei Smerlanko: "The plant cytoskeleton : recent advances in the study of the plant microtubule-associated proteins MAP65, MAP190 and the Xenopus MAP215-like protein, MOR1"Plant Mol

Patrick J.Hussey、Timothy J.Hawkins、Hisako Igarashi、Despina Kaloriti、Andrei Smerlanko：“植物细胞骨架：植物微管相关蛋白 MAP65、MAP190 和非洲爪蟾 MAP215 样蛋白 MOR1 研究的最新进展”植物