中枢神経における神経細胞の遊走機構

中枢神经系统神经细胞的迁移机制

• 批准号: 02J02794
• 负责人: 佐々木 慎二
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J02794/
• 关键词: 神経発生; 神経細胞遊走; 大脳皮質構造; 分子生物学; 発生工学

発生期での神経細胞の遊走の結果、個々の神経細胞の脳での位置決定が行われ、機能的な神経ネットワークが形作られる。本研究は、ヒト無脳回症の原因遺伝子LIS1に着目し発生期の神経細胞の遊走機構の解明を目的とした。特に、LIS1とNUDELが、モーター蛋白質ダイニンと微小管剪断蛋白質カタニンの制御を通し、どのように神経細胞遊走を制御するか生体内外で検証した。初年度は、Nudelノックアウトマウスの作出および表現型解析と、機能解析のため組み換え蛋白質の産生、精製法の確立を重点的に行った。1、Nudelの遺伝子改変マウスを作成し、NUDELの神経細胞遊走での役割を遺伝学的に解析した。LIS1変異マウスとの交配により、遺伝学的な相互作用を証明した。(Califorina大学、Wynshaw-Boris先生との共同研究)。2、cytoplasmic dyneinのモーター活性に対するNUDELとLIS1の影響を解析するため、バキュロウイルスを使用し昆虫細胞に組み換え蛋白質を発現させ、精製する系を確立した(東京大学、豊島先生との共同研究)。3、kataninの微小管剪断活性に対するNUDELとLIS1の影響を解析するため、バキュロウイルスを使用し昆虫細胞に組み換え蛋白質を発現させ、精製する系を確立した。4、NudelとLis1のloxP条件付きノックアウトマウスで、電気穿孔法を用いCre遺伝子を遊走神経細胞に特異的に発現させ、NUDELとLIS1の遊走に対する役割を解析する系を開発した(慶應大学、仲嶋先生との共同研究)。5、kataninノックアウトマウスの作出を行った。(Calfornia大学、Wynshaw-Boris先生と理化学研究所、バイオリソースセンター吉木先生との共同研究。)平成15年1月から平成15年3月まで共同研究員として理化学研究所、バイオリソースセンターでノックアウトマウスの作製にあった。

The results of neuronal migration during development, the location of individual neuronal cells determine their behavior, and functional neuronal growth patterns change. This study aims to elucidate the mechanism of neuronal migration in the development of Alzheimer's disease. In particular, LIS1, NUDEL, and microtubule shear protein regulation are identified in vivo and in vitro. In the early years, Nudel was involved in phenotype analysis, functional analysis, protein production and purification. 1. Nudel's genetic modification, analysis of NUDEL's neural cell migration and genetic modification LIS1 is a proof of mating and genetic interactions. (Joint study by Califorina University and Mr. Wynshaw-Boris). 2. Analysis of the effects of cytoplasmatic protein on NUDEL and LIS1 activity and its use in insect cell assembly and protein production and purification (joint research by University of Tokyo and Toyoshima). 3. The effect of katanin on NUDEL and LIS1 was analyzed, and the system of protein production and purification was established. 4. The development of the loxP condition of Nudel and Lis1, the specific detection of the loxP condition of Nudel and Lis1 by electroporation, and the analysis of the loxP condition of Nudel and Lis1 by electroporation (Keio University and Nakajima). 5, katanin (Joint research by Calfornia University, Wynshaw-Boris, Institute of Physical Chemistry, and Yoshiki.) January, 2015 From March, 2015 Co-researcher, Institute of Physical Chemistry, Office of Production