イトマキヒトデ未受精卵における細胞死

海星未受精卵的细胞死亡

• 批准号: 02J03520
• 负责人: 佐々木 加代子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Ochanomizu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J03520/
• 关键词: イトマキヒトデ; 未受精卵; アポトーシス; カスパーゼ3; MAPK; Mos; p38 MAPK; カスパーゼ-3; p38MAPK

イトマキヒトデ成熟卵を受精させずに放置すると、ホルモン処理後9-12時間でカスパーゼ3が活性化し、細胞膜のブレッビングとアポトーシス小体の放出を経て死に至る。カスパーゼ37活性化にはMAPKが数時間活性化することが必要であるが、その分子経路の詳細は明らかではない。そこで本研究では、MAPKによるカスパーゼ3活性化の解明を目的とした。まず、阻害剤処理により、アポトーシス誘導にはいつ頃までMAPKが活性化していればいいのか調べたところ、どの個体でもブレッビング開始の2時間程度前までMAPKの恒常的な活性が必要であった。一方、MAPKはカスパーゼ3活性化とほぼ同時に不活性化されるが、その意義は明らかではなかった。そこで、MAPK依存期間後(ブレッビング開始の約2時間前)に、ヒトデ卵をU0126処理したところ、有意にブレッビング開始とカスパーゼ3活性化が促進された。又、ブレッビング開始直前の卵にGST-Mosを微量注入したところアポトーシス開始が有意に遅れた。この結果は、MAPKの不活性化によってカスパーゼ3が活性化可能となることを示唆している。更に、カスパーゼ3活性によってMAPKが不活性化されたのではないことは、卵をカスパーゼ3阻害剤で処理してもMAPKが自律的に不活性化したことからも支持された。又、培養細胞系でアポトーシス誘導に働くことが知られるp38MAPKの挙動を、ヒトデ卵のアポトーシスでも調べたところ、MAPKとは対照的に、カスパーゼ3が活性化するころから強い活性がみられた。そこで卵をp38MAPKの阻害剤で処理したところ、ブレッビング後のアポトーシス小体の形成が阻害された。したがって、p38MAPKはアポトーシス小体の形成に関与することが明らかになった。以上の成果をMBC誌04年3月号に掲載予定である。また、二次元電気泳動装置を購入し、MAPK基質蛋白質の検索を行った。現在、目的とするMAPK基質蛋白質のスポットが検出される条件を検討中である。

イ ト マ キ ヒ ト デ を mature eggs fertilized さ せ ず に placed す る と, ホ ル モ ン 処 principle 9-12 time after で カ ス パ ー ゼ 3 が activeness し, cell membrane の ブ レ ッ ビ ン グ と ア ポ ト ー シ ス corpuscle の release を 経 て に to る to death. カ ス パ ー ゼ 37 activeness に は MAPK が several time activeness す る こ と が necessary で あ る が, そ molecular 経 の way の detailed は Ming ら か で は な い. Youdaoplaceholder0 を で で this study で を and MAPKによるカスパ ゼ ゼ3 activation <s:1> clarification を objective と た た. ま ず, resistance against tonic 処 に よ り, ア ポ ト ー シ ス induced に は い つ recollected ま で MAPK が activeness し て い れ ば い い の か adjustable べ た と こ ろ, ど の individual で も ブ レ ッ ビ ン グ ま before の 2 time degree で MAPK の constant な active が necessary で あ っ た. Party, MAPK は カ ス パ ー ゼ 3 activeness と ほ ぼ に not active at the same time the さ れ る が, そ の meaning は Ming ら か で は な か っ た. そ こ で, after MAPK dependent during (ブ レ ッ ビ ン グ) before の about 2 time に, ヒ ト デ eggs を U0126 処 Richard し た と こ ろ, intentionally に ブ レ ッ ビ ン グ began と カ ス パ ー ゼ 3 activeness が promote さ れ た. Again, ブ レ ッ ビ ン グ began to march forward の egg に GST - Mos を trace injection し た と こ ろ ア ポ ト ー シ ス starts が に 遅 れ た. The <s:1> <s:1> results て and MAPK <s:1> inactivation によってカスパ によってカスパ ゼ ゼ3が activation may となる とを とを suggest that て る る る. More に, カ ス パ ー ゼ 3 active に よ っ て MAPK が not activeness さ れ た の で は な い こ と は, egg を カ ス パ ー ゼ 3 resistance against tonic で 処 Richard し て も MAPK が に not activeness of self-discipline し た こ と か ら も support さ れ た. Again, culture cell lines で ア ポ ト ー シ ス induced に 働 く こ と が know ら れ る p38MAPK の 挙 を, ヒ ト デ eggs の ア ポ ト ー シ ス で も adjustable べ た と こ ろ, MAPK と は according に, seaborne カ ス パ ー ゼ 3 が activeness す る こ ろ か ら stronger い activity が み ら れ た. そ こ で eggs を p38MAPK の resistance against tonic で 処 Richard し た と こ ろ, ブ レ ッ ビ ン グ after の ア ポ ト ー シ ス corpuscle の form が resistance against さ れ た. Youdaoplaceholder0 たがって, p38MAPK アポト アポト シス シス small body <s:1> formation に is related to する ら とが とが になった になった になった. The above results were published in the March 2004 issue of the MBC journal に as である. Youdaoplaceholder0, purchase of 2D electrical movement device を, を, MAPK matrix protein <s:1> 検, を, った. Now, the objective is to とするMAPK matrix protein スポットが検 to emerge from される conditions を検 in である.

项目成果

Kayoko Sasaki, Kazuyosi Chiba: "Induction of apoptosis in starfish eggs requires spontaneous inactivation of MAPK (ERK) followed by activation of p38 MAPK"Molecular Biology of the Cell. 15(3). 1387-1396 (2004)

Kayoko Sasaki、Kazuyosi Chiba：“海星卵细胞凋亡的诱导需要 MAPK (ERK) 自发失活，然后激活 p38 MAPK”《细胞分子生物学》。