酵母オートファゴソーム形成機構の解明

阐明酵母自噬体形成机制

• 批准号: 02J03994
• 负责人: 鈴木 邦律
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J03994/
• 关键词: オートファジー; 自食作用; オートファゴソーム; ATG; アミノペプチダーゼI; Cvt経路; 液胞; GFP; APG; Cvt pathway

真核細胞が栄養飢餓環境に適応するために、自己の構成成分を分解する現象は自食作用と呼ばれる。自食作用は、オートファゴソーム(以下AP)の形成とAPの細胞内分解コンパートメントであるリソソーム/液胞との融合、それに続く分解という一連の過程を取ることが知られ、単細胞真核生物から高等動植物に至るまで広く保存されている細胞応答機構である。単細胞真核生物である出芽酵母にも自食作用が見いだされており、自食作用に必須な遺伝子群ATGの解析が進められている。これまでAtgタンパク質の局在解析は、細胞にプラスミドを持たせた系で進められてきた。新規に導入したGreen Fluorescent Protein(以下GFP)タギング法は、出芽酵母ゲノム中の標的部位に直接GFPの配列を挿入する方法で、酵母生細胞内で生理的条件下でのタンパク質の局在解析を進める上で有効な手法である。そこで本年度は、この手法を用いて可能な限りのAtgタンパク質にGFPタグを付け、それら融合タンパク質の局在を確認した。さらに、出芽酵母の利点を生かし、それぞれの株に対し網羅的にATG遺伝子の破壊を行う系を開発し、遺伝子破壊を実行に移した。遺伝子破壊株内でのGFP融合Atgタンパク質の局在変化を遺伝学的に解析した結果は、今まで知られていなかったAtgタンパク質間の相互作用を明らかにすると共に、機能未知であったAtgタンパク質の機能を明らかにする上でも有用な情報を我々にもたらしつつある。

Eukaryotic cells が栄 provide a starvation environment に suitable for 応するために, their own <s:1> constituent components を decomposition する phenomenon <s:1> autotrophic と call ばれる. Eat は, オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム (AP) の form と AP の cell decomposition コ ン パ ー ト メ ン ト で あ る リ ソ ソ ー ム / vacuole と の fusion, そ れ に 続 く decomposition と い う を の process in a row to take る こ と が know ら れ, 単 cell eukaryotic か ら に higher plants and animals to る ま で hiroo く save さ れ て い る cells 応 answer institutions で あ る. 単 eukaryotic cells で あ る budding yeast に も since food effect が see い だ さ れ て お り, eat に must な heritage 伝 subgroup ATG の parsing が into め ら れ て い る. こ れ ま で Atg タ ン パ ク qualitative の bureau in analytical は, cell に プ ラ ス ミ ド を hold た せ た department で into め ら れ て き た. New rules に import し た Green Fluorescent Protein (GFP) タ ギ ン グ は, budding yeast ゲ ノ ム の mark に directly part of GFP の match column を scions into す る method で で, yeast cell physiological conditions で の タ ン パ ク qualitative の bureau in analytical を め る で have sharper な gimmick で あ る. そ こ で は this year, こ の gimmick を with い て may な limits り の Atg タ ン パ ク qualitative に GFP タ グ を pay け, そ れ ら fusion タ ン パ ク qualitative の bureau in を confirm し た. さ ら に, budding yeast の tartness を raw か し, そ れ ぞ れ の strains に し snare of seaborne に ATG posthumous son 伝 の broken 壊 を line う started を 発 し, but 伝 broken 壊 を move line be に し た. Heritage 伝 son broken 壊 strains within で の GFP fusion Atg タ ン パ ク qualitative の bureau in を - but 伝 learn に parsing し た results は, today ま で know ら れ て い な か っ た Atg タ ン パ の interaction between ク qualitative を Ming ら か に す る と に, function unknown で あ っ た Atg タ ン パ ク qualitative の function を Ming ら か に す る on で も な useful intelligence を I 々 に も た ら し Youdaoplaceholder0 ある.

项目成果

鈴木邦律: "選択的なタンパク質輸送経路としての酵母オートファジー"実験医学(増刊). 22・2. 150(256)-154(260) (2004)

Kuninori Suzuki：“酵母自噬作为选择性蛋白质转运途径”实验医学（特别版）150（256）-154（260）（2004）。

鈴木邦律: "オートファゴソーム膜の形成に必須なPre-autophagosomal structure (PAS)"生化学. 75・6. 492-499 (2003)

Kuninori Suzuki：“自噬体膜形成所必需的前自噬体结构（PAS）”生物化学75・6（2003）。

野田健司: "Yeast autophagosomes : de novo formation of a membrane structure"TRENDS in Cell Biology. 12(5). 231-235 (2002)

Kenji Noda：“酵母自噬体：膜结构的从头形成”细胞生物学趋势 12(5) (2002)。

鈴木邦律: "Studies of cargo delivery to the vacuole mediated by autophagosomes in Saccharomyces cerevisiae"Developmental Cell. 3. 815-824 (2002)

Kuninori Suzuki：“酿酒酵母中自噬体介导的货物递送到液泡的研究”发育细胞。 3. 815-824 (2002)