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液-液相分離により形成される新規細胞内区画の探索

探索液-液相分离形成的新细胞内区室

基本信息

批准号：
21K19205
负责人：
鈴木邦律
金额：
$ 4.16万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

当研究室では共同研究を通じて、選択的オートファジーの基質である、Ape1複合体が液-液相分離により形成される構造体であることを示した（Yamasaki etal., Mol. Cell, 2020）。また我々は最近になって、Ape1にGFPを融合することで高温培養条件下の液-液相分離が阻害され、Ape1複合体形成が不能となる現象を見いだした。本研究課題では、GFPを融合するとタンパク質の活性が温度感受性になる現象が他のタンパク質にも適用可能であることを調べることを目的としている。出芽酵母の生育に必須な遺伝子を破壊すると致死となる。こうした遺伝子は“必須遺伝子”と呼ばれる。上述のように、同様に必須遺伝子にコードされたタンパク質にGFPを融合すると、高温条件下で相分離が起こらなくなり、活性を失う、つまり致死となる可能性を想定した。出芽酵母では、各遺伝子がコードするタンパク質のC末端にGFPを融合した4,100種類余りの株のコレクションが存在する。初年度の研究では、これらの株を寒天培地にて培養し、高温で生育が悪くなる株をスクリーニングした。初年度の研究で、4,100種類の株の一次スクリーニングが終了し、556種類の株が高温感受性の生育を示すことが明らかとなった。本年度はスポッティングアッセイによる二次スクリーニングを終了し、119株が強い表現型を示し、162株が弱い表現型を示すことが明らかとなった。現在強い表現型を示す株を用いて温度変化によるタンパク質の局在変化を蛍光顕微鏡を用いて調べている。

When the lab jointly studied and selected the Ape1 complex, liquid-liquid phase separation (LLSI) and Yamasaki etal., Mol. Cell, 2020). Under the condition of high temperature incubation, liquid-liquid phase separation, hindrance and Ape1 complex can not be formed by the combination of Ape1, GFP, fusion and high temperature culture. In this study, GFP fusion system was used to detect temperature sensitivity, temperature sensitivity and temperature sensitivity. Saccharomyces cerevisiae must be fertile and must be broken and lethal. Please tell me that you must have a child, and you must call your child. The abovementioned temperature, the same temperature, the temperature, temperature, temperature The yeast sprouting, each sub-cell, the C-terminal GFP fusion, the remaining 4100 types of yeast, and the presence of microorganisms in each plant. At the beginning of the year, the plants were cultivated in cold weather, the earth was cultivated in cold weather, and the plants were born at high temperature. In the first year of the study, 4100 and 556 strains were tested for high temperature susceptibility to high temperature. This year, there were 119 strains of strong phenotype and 162 strains of weak phenotype. At present, the temperature is used to change the temperature of the plant, and the temperature is used.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Saccharomyces cerevisiaeのCvt pathwayは高温感受性の経路である

酿酒酵母的Cvt途径是一个高温敏感途径

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hirata Eri;Shirai Kyo;Kawaoka Tatsuya;Sato Kosuke;Kodama Fumito;Suzuki Kuninori;鈴木邦律，平田恵理
通讯作者：
鈴木邦律，平田恵理

Liquid droplet formation and cytoplasm to vacuole targeting of aminopeptidase I are temperature sensitive in Saccharomyces cerevisiae

DOI：
10.1002/1873-3468.14509
发表时间：
2022-10-19
期刊：
FEBS LETTERS
影响因子：
3.5
作者：
Suzuki，Kuninori;Hirata，Eri
通讯作者：
Hirata，Eri

出芽酵母液胞内リパーゼAtg15はふたつの独立した機能ドメインを有する

芽殖酵母液泡内脂肪酶Atg15具有两个独立的功能域。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hirata Eri;Shirai Kyo;Kawaoka Tatsuya;Sato Kosuke;Kodama Fumito;Suzuki Kuninori;鈴木邦律，平田恵理;平田恵理，白井亨，佐藤公亮，児玉史人，鈴木邦律
通讯作者：
平田恵理，白井亨，佐藤公亮，児玉史人，鈴木邦律

生命応答システム分野（鈴木邦律研究室）ウェブページ

生命反应系统领域（铃木邦一研究所）网页