大腸菌走化性におけるタンパク質間相互作用のダイナミクス

大肠杆菌趋化性中蛋白质-蛋白质相互作用的动力学

• 批准号: 02J05478
• 负责人: 塩見 大輔
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J05478/
• 关键词: 大腸菌; 走化性; レセプター; 細胞内局在; S-S架橋; シグナル増幅; メチル化; リガンド結合; 適応; メチル化酵素; タンパク質局在化機構; 抑圧変異; 分子認識

多くの感覚応答系において、入力されたシグナルの増幅は必須である。大腸菌走化性においても、走化性レセプター(MCP)がシグナルタンパク質(CheA,CheWなど)と菌体の極で複合体を形成しており、この極複合体内でのMCPダイマー間の相互作用がシグナル増幅を引き起こすと考えられている。我々は、アスパラギン酸レセプターTarのペリプラズム領域に2つのシステイン残基(サブユニット界面とダイマー間)を導入し、Tarダイマー間の相互作用を調べた。我々は、架橋されたTarが推定6量体を形成することを明らかにした。これはセリンレセプターTsrの細胞質断片の結晶が6量体ユニットを形成することと一致する。また、この推定6量体が誘引物質(アスパラギン酸)の添加により減少した。しかし、アスパラギン酸の添加はTar-GFPの極局在に大きく影響しなかった。つまり、誘引物質の添加により、ダイマー間の相互作用が変化したことが分かる。このようなMCPダイマー間相互作用の変化がシグナル増幅に関与しているかもしれない。これまでに、MCPが極に局在していることは明らかになっているが、この極局在がなんらかの制御を受けているかは明らかでない。MCPはCheR,CheBによりメチル化、脱メチル化修飾を受ける。これらの酵素の極局在がMCPのメチル化に依存していることが分かった。これは、これらの標的であるMCPの局在が自身のメチル化に制御されている可能性を示唆している。Tar-GFPのメチル化レベルを変えてTar-GFPの極局在を観察したところ、確かにメチル化レベルが高いほどTar-GFPはより極へ局在した。これは、CheA,CheWがないときにより顕著に観察された。またCheA,CheWがないときに忌避物質を加えると、Tarはクラスターを形成した。このことは、Tar-GFPの極局在がわずかながらもリガンドに制御されていることを示している。また、脱メチル化型Tar-GFPとTsrを共発現させるとTar-GFPの極局在が促進された。このことは、異種レセプターダイマー間で複合体を形成し、極に局在していることを示している。 (一部投稿準備中)

The number of people who feel the pressure is increasing. E. coli chemotropic agent, chemotropic agent (MCP) and cell polar complex are formed. The interaction between MCP and cell in polar complex increases the amplitude of MCP. The interaction between two kinds of residues in the domain of Tar is regulated by the introduction of Tar residues into the domain. I'm going to build a bridge. The crystal of the cytoplasmic fragment of Tsr is formed in the same way as the crystal of Tsr. This is estimated to be the case with the addition of 6 quantities of attractive substances (such as citric acid). The addition of tar-GFP has a great impact on the environment. The interaction between the addition of the attractant and the attractant changes. The interaction between MCP and NMP is changing. This is the first time that the MCP has been in a state of emergency. MCP CheR,CheB. The enzyme is highly dependent on MCP for its conversion. The possibility of MCP's control over its own development is demonstrated. Tar-GFP is the most important part of Tar-GFP. Chew, Chew. A, Chew, Chew Tar-GFP is the most important part of the game. Tar-GFP is promoted by the development of Tar-GFP. A complex of heterogenous and heterogenous substances is formed. (Part 1 is in preparation)

项目成果

Shiomi, D.et al.: "Intragenic suppressors of a mutation in the aspartate chemoreceptor gene that abolishes binding of the receptor to methyltransferase"Microbiology. 148(10). 3265-3275 (2002)

Shiomi, D.等人：“天冬氨酸化学感受器基因突变的基因内抑制因子，该突变消除了受体与甲基转移酶的结合”微生物学。

Banno S, Shiomi D, Homma M, Kawagishi I.: "Targeting of the methylesterase/deamidase CheB to the polar receptor-kinase cluster in an Escherichia coli cell"Molecular Microbiology. (in press). (2004)

Banno S、Shiomi D、Homma M、Kawagishi I.：“将甲酯酶/脱酰胺酶 CheB 靶向大肠杆菌细胞中的极性受体激酶簇”分子微生物学。