転写因子Sp1におけるトランスースプライシングの分子メカニズムの解析

转录因子Sp1反式剪接的分子机制分析

• 批准号: 02J08030
• 负责人: 高原 照直
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J08030/
• 关键词: Sp1; 転写; トランス-スプライシング; 転写因子

昨年度行った染色体中に変異Sp1遺伝子を組み込んだ細胞株を用いた解析から、Sp1 mRNA前駆体間のトランス-スプライシングが起こる上でSp1遺伝子のイントロン3の長さが重要であることが分かった。スプライシングは転写中に進行することが示唆されていることから、長やイントロン3においてはその5'スプライス部位が合成された後、下流の3'スプライス部位が現れるまでに長い時間がかかる。このためにイントロン3の5'スプライス部位はしばらくの間露呈しており、これが近傍で転写されつつある別のmRNA前駆体中のイントロン1のスプライス受容部位と組み合うことで、エクソン3-2の連結を生み出すトランス-スプライシングが起こることが推測きれた。そこでトランス-スプラィシングが起こらなくなった変異Sp1遺伝子の短いイントロン3に転写停止を引き起こす配列を導入して人工的に3'スプライス部位の出現を遅延させるような変異Sp1遺伝子を用いた解析を行ったところ、予想したようにこの変異Sp1遺伝子ではトランス-スプライシングが観察された。このことから、ほ乳類で起こるトランス-スプライシングは下流の3'スプライス部位の合成の遅延の結果生じると考えられた。一方で、培養細胞にSp1遺伝子断片を持つプラスミドを一過性導入し、プラスミドから転写されたmRNA前駆体を用いたトランス-スプライシングの解析を行った。その結果、プラスミド由来のmRNA前駆体間ではどのような5'および3'部位の組み合わせでもトランス-スプライシングが起こることをがわかった。また、一過性導入したプラスミド由来のmRNA前駆体間のトランス-スプライシングを促進する配列を見いだした。

Last year, the cell lines of Sp1 chromosomes were analyzed by microarray analysis, and the cell lines of Sp1 mRNA were analyzed by microarray analysis, and the Sp1 spools were collected in front of each other. The three-year long-term important cell cycle was analyzed. In the course of writing, the equipment is used to indicate that the parts of the parts of the equipment that are used for a long period of time after the synthesis of the parts of the parts of the equipment, the parts of the parts of the system, the parts of the parts of the equipment, the parts of the parts of the equipment, the parts of the parts, the parts, and the parts. In the front of the mRNA, please contact the tolerable parts of the body in order to make sure that the parts of the system are closed, and the parts of the body that are tolerated are connected to each other. In the front of the mRNA, there is a connection between the two parts. I'm sorry to hear that. I don't know. I don't know what to do. I'd like to know if you want to know Sp1. In order to improve the quality of the fruit, it is necessary to make a comprehensive analysis of the lower parts of the system. On the one hand, the Sp1 fragments are used to analyze the data in the front of the mRNA. The result of the test, the cause of the problem, and the reason why the mRNA is in front of the body. The system is located in the front part of the system, which is located in the front of the body. As soon as possible, the cause of the problem is that in the front of the mRNA, the system is used to promote the allocation of health care equipment.

项目成果

Terunao Takahara: "The trans-spliced variants of Sp1 mRNA in rat"Biochemical Biophysical Research Communications. 298. 156-162 (2002)

Terunao Takahara：“大鼠 Sp1 mRNA 的反式剪接变体”生化生物物理研究通讯。