アミノ酸-mTOR経路構成因子の同定と解析

氨基酸-mTOR通路成分的鉴定和分析

• 批准号: 08J10074
• 负责人: 高原 照直
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J10074/
• 关键词: mTOR; アミノ酸; 酵母; シグナル伝達

前年度に引き続き、TORC1活性制御に関わる新規分子の同定に向けて、TPCKの標的分子として得られたDLATの解析をおこなった。DLATの過剰発現やノックダウンにより、TPCKによるmTORC1阻害能が変化するかを、S6Kリン酸化や4EBP1のリン酸化について調べたが、ほとんど影響を示さなかった。また、DLATの発現量自体もTORC1活性にほとんど影響を示さなかった。このことは、DLAT以外の分子をTPCKが標的にしてmTORC1活性に影響を及ぼす可能性を示唆するが、DLAT以外の候補分子は現在のところ不明である。前年度までに行った酵母での遺伝学的スクリーニングから得られた分子Pbp1について、TORC1活性制御への関連を調べた。Pbp1の過剰発現は、様々な栄養源に対して一般にTORC1活性抑制能を示すことがわかった。Pbp1過剰発現はTORC1の複合体形成に影響を与えなかったため、TORC1活性自体あるいは細胞内の局在に影響を与えている可能性か考えられた。Pbp1過剰発現時のTORC1の細胞内局在を観察したところ、興味深いことにPbp1過剰発現により細胞質foci形成していた。Pbp1はグルコース飢餓などのストレス下でmRNAの翻訳の停止に依存して形成されるfoci(stress granule)の構成成分の1つと考えられているが、TORC1はPbp1 fociと共局在していた。このことは、Pbp1過剰発現によるfoci形成がTORC1活性化阻害に寄与することを示唆する。さらに、生理的な条件下でのPbp1とTORC1との共局在を調べると、グルコース飢餓に伴いTORC1の一部分がstress granuleと共局在した。また、グルコース飢餓時のStress granule形成が妨げられるpub1破壊株でのTORC1活性化への影響を調べると、グルコース刺激後のTORC1の活性化が早く起こっていた。これらのことから、グルコース飢餓下でTORC1がstress granulesヘリクルートされることにより、グルコース刺激後のTORC1活性化を一時的に遅らせていると考えられた。このような一時的な抑制は細胞のストレス応答にとってなんらかの意義があると推測しており、今後TORC1活性制御における新たな視点をもたらす可能性がある。

In the previous year, TORC1 activity control was determined by the molecular identity of TORC1, and the molecular identity of TORC 1 was determined by DLAT. DLAT's over-development, TPCK's mTORC1 resistance, S6K's acidification, EBP1's acidification, and its influence are shown. DLAT and DLAT are active in the TORC1 system. Molecules other than DLAT are targets for mTORC1 activity, and the likelihood of their presence is unknown. In the past year, the gene expression of yeast has been detected and the relationship between PbP1 and TORC1 activity has been modulated. Pbp1 protein expression is related to TORC1 activity, which is generally inhibited by protein expression. Pbp1 over-expression and TORC1 complex formation influence and TORC1 activity in vivo influence and TORC1 activity in vivo influence Pbp1 protein expression in TORC1 cells is detected in the cytoplasm, and Pbp1 protein expression is detected in the cytoplasm. Pbp1 mRNA translation is dependent on the formation of foci(stress granule) and TORC1 mRNA translation is dependent on the formation of foci(stress granule). The formation of foci and the activation of TORC1 in the presence of PbP1 Under physiological conditions, Pbp1 and TORC1 are part of the stress granule. Stress granule formation during starvation affects the regulation of TORC1 activation in PUB1 cells, and TORC1 activation after stimulation begins early. Torc1 stress granules are activated in the presence of hunger. The possibility of a new viewpoint for TORC1 activity control in the future may be inferred.