アミノ酸-mTOR経路構成因子の同定と解析

氨基酸-mTOR通路成分的鉴定和分析

• 批准号: 08J10074
• 负责人: 高原 照直
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J10074/
• 关键词: mTOR; アミノ酸; 酵母; シグナル伝達

前年度に引き続き、TORC1活性制御に関わる新規分子の同定に向けて、TPCKの標的分子として得られたDLATの解析をおこなった。DLATの過剰発現やノックダウンにより、TPCKによるmTORC1阻害能が変化するかを、S6Kリン酸化や4EBP1のリン酸化について調べたが、ほとんど影響を示さなかった。また、DLATの発現量自体もTORC1活性にほとんど影響を示さなかった。このことは、DLAT以外の分子をTPCKが標的にしてmTORC1活性に影響を及ぼす可能性を示唆するが、DLAT以外の候補分子は現在のところ不明である。前年度までに行った酵母での遺伝学的スクリーニングから得られた分子Pbp1について、TORC1活性制御への関連を調べた。Pbp1の過剰発現は、様々な栄養源に対して一般にTORC1活性抑制能を示すことがわかった。Pbp1過剰発現はTORC1の複合体形成に影響を与えなかったため、TORC1活性自体あるいは細胞内の局在に影響を与えている可能性か考えられた。Pbp1過剰発現時のTORC1の細胞内局在を観察したところ、興味深いことにPbp1過剰発現により細胞質foci形成していた。Pbp1はグルコース飢餓などのストレス下でmRNAの翻訳の停止に依存して形成されるfoci(stress granule)の構成成分の1つと考えられているが、TORC1はPbp1 fociと共局在していた。このことは、Pbp1過剰発現によるfoci形成がTORC1活性化阻害に寄与することを示唆する。さらに、生理的な条件下でのPbp1とTORC1との共局在を調べると、グルコース飢餓に伴いTORC1の一部分がstress granuleと共局在した。また、グルコース飢餓時のStress granule形成が妨げられるpub1破壊株でのTORC1活性化への影響を調べると、グルコース刺激後のTORC1の活性化が早く起こっていた。これらのことから、グルコース飢餓下でTORC1がstress granulesヘリクルートされることにより、グルコース刺激後のTORC1活性化を一時的に遅らせていると考えられた。このような一時的な抑制は細胞のストレス応答にとってなんらかの意義があると推測しており、今後TORC1活性制御における新たな視点をもたらす可能性がある。

In the previous year, the new regulation molecule of TORC1 activity control was determined, and the target molecule of TPCK was analyzed in DLAT. DLAT's over-the-counter damage control, TPCK's mTORC1 damage prevention ability, and the change of damageを, S6K リン acidification や4EBP1 のリン acidification について Adjustment べたが, ほとんど Impact を Show さなかった. The amount of DLAT and DLAT is affected by the activity of TORC1. The influence of TPCK on mTORC1 activity as a target molecule other than DLAT and the likelihood of its impact on mTORC1 activity have been shown, and candidate molecules other than DLAT are currently unknown. The スクリーニングからられた molecule Pbp1について and TORC1 activity control へのrelated をadjusted べた were learned from the previous year's までに行ったyeast での伝. Pbp1 has the ability to inhibit the activity of TORC1 and has the ability to inhibit the activity of Pbp1. Pbp1 has been shown to have an influence on the formation of the TORC1 complex, and the TORC1 activity itself has an influence on the intracellular localization, and the possibility has been investigated. Pbp1 is present in the cells and the TORC1 is localized in the cells, and the interest is deep. Pbp1 is present in the cytoplasm and the foci are formed in the cytoplasm. Pbp1はグルコースhungerなどのストレス下でmRNAのturn訳のstopにdependenceしてformされるfoci(stress granule) の1つと考えられているが, TORC1はPbp1 fociと合bureau in していた.このことは, Pbp1 over-existence and によるfoci formation がTORC1 activation blocks に发 and することをshows the instigation of する.さらに、Physiological な conditionsでのPbp1とTORC1との国产在を Adjustment べると、グルコースhunger に companion いTORC1のpart of がstress granuleと国产在した. Stress when you are hungry The formation of granule is hindered by the activation of TORC1 by the broken strain and the activation of TORC1 by the influence of the stimulation. TORC1がstress Granule ヘリクルートされることにより, TORC1 activation after グルコース stimulation is a temporary に遅らせていると卡えられた.このようなtemporary inhibition of cells のストレス応respond にとってなんらかのmeaning があると push Measure the possibility of TORC1 activity control in the future from a new perspective.