JAPキナーゼ抑制因子JAB1及びJAB2の作用機序と生理機能の解明

阐明JAP激酶抑制剂JAB1和JAB2的作用机制和生理功能

• 批准号: 02J08744
• 负责人: 佐々木 敦朗
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J08744/
• 关键词: チロシンキナーゼ; FGF受容体; Ras; MAPキナーゼ; EGF受容体; Raf; 細胞膜; シグナル伝達

サイトカインは受容体の細胞内ドメインに会合するJAKチロシンキナーゼを介して細胞内にシグナルを伝える。STATはそのシグナルを核へ伝える重要な転写因子のひとつである。さらにRasも活性化され、シグナル伝達系できわめて重要な位置を占める。RasはC末を脂質で修飾されており細胞膜に存在し増殖因子など様々な外界の刺激で活性化される。活性化されたRasは主にRafを細胞膜にリクルートしそこでRahはりん酸化(特にセリン388)され活性化される。活性化されたRafはMEKを、MEKはMAPキナーゼを活性化するカスケードを形成する。このようにRas/MAPキナーゼ経路の正のシグナル経路は近年かなりの理解が進んだが負の制御メカニズムに関しては未だ不明な点が多い。最近ショウジョウバエでチロシンキナーゼ/MAPキナーゼ系の制御因子としてSproutyが同定され我々はほ乳類で4種類のSprouty分子があること、類似したSpred分子が存在することを見い出した。そのうち少なくともSprouty2,Sprouty4はEGF、FGF、フォルボールエステルなどの刺激によってMAPキナーゼを介して転写誘導された。興味深いことにSproutyはVEGFによるMAPキナーゼの活性化を抑制するものの、EGFによるMAPキナーゼ活性化には影響しない。Sprouty感受性と非感受性の経路がある。我々はSproutyのN末端に保存されたチロシン残基に注目し、これをフェニルアラニンに置換するとドミナントネガティブ型分子として作用し、FGFシグナルを増強することを発見した。Sproutyは複数の分子が一つの細胞に同時に発現していることが多いのでこの変異体はSproutyの哺乳類での生理機能を調べる上で有用と考えられる。この変異体はSpredには影響しなかったのでSpredとSproutyは別の分子機構でRas/Rafの活性化を抑制しているものと考えられる。SproutyがMAPキナーゼをどのようにして抑制するのか、あるいはそれ以外のシグナル経路にどのように影響するのか今後解析したい。

细胞因子通过与受体的细胞内结构域相关的JAK酪氨酸激酶在细胞中传播信号。 STAT是将信号传输到核的重要转录因子之一。 RAS也被激活并占据信号转导系统中极为重要的位置。 RAS在C末端中用脂质修饰，并存在于细胞膜中，并被各种外部刺激（例如生长因子）激活。活化的RAS主要募集RAF到RAH被磷酸化（尤其是丝氨酸388）并激活的细胞膜。激活的RAF形成了激活MEK和MEK的级联反应，形成了激活MAP激酶的级联反应。因此，近年来对RAS/MAP激酶途径的正信号途径有了广泛的了解，但是关于负调控机制仍然有许多未知数。最近，发芽被确定为果蝇中酪氨酸激酶/MAP激酶系统的调节剂，我们发现哺乳动物中存在四种不同的发芽分子，并且存在类似的SPR分子。其中，至少通过刺激EGF，FGF，Phorbol酯等通过MAP激酶来转录诱导的至少发芽2和发芽4。有发芽和不敏感的途径。我们专注于在发芽的N末端保守的酪氨酸残基，发现用苯丙氨酸代替它是主要的负分子并增强FGF信号。由于多个分子通常在一个细胞中同时表达，因此该突变体被认为在检查哺乳动物中发芽的生理功能时很有用。由于该突变体对SPRED没有影响，因此据信Sprty sprouty通过不同的分子机制抑制Ras/Raf的激活。我想在将来分析发芽抑制MAP激酶的方式，或它如何影响其他信号途径。

项目成果

Sasaki A, Inagaki-Ohara K, Yoshida T, et al.: "The N-terminal truncated isoform of SOCS3 translated from an alternative initiation AUG codon under stress conditions id stable due to the lack of a major ubiquitination site, Lys-6"J Biol Chem. 278. 2432-243

Sasaki A、Inagaki-Ohara K、Yoshida T 等人：“由于缺乏主要泛素化位点 Lys-6，在应激条件下从替代起始 AUG 密码子翻译而来的 SOCS3 N 端截短亚型保持稳定”

Endo T, Sasaki A, Minoguchi M, et al.: "CIS1 interacts with the Y532 of the Prolactin Receptor and Suppresses Prolactin-Dependent STAT5 Activation"J.Biochem. 133. 109-113 (2003)

Endo T、Sasaki A、Minoguchi M 等人：“CIS1 与催乳素受体的 Y532 相互作用并抑制催乳素依赖性 STAT5 激活”J.Biochem。

Sasaki A, Taketomi T, Kato R, Saeki K, et al.: "Mammalian Sprouty4 suppresses Ras-independent ERR activation by binding to Raf1"Nature Cell Biol. 5. 427-432 (2003)

Sasaki A、Taketomi T、Kato R、Saeki K 等人：“哺乳动物 Sprouty4 通过与 Raf1 结合抑制 Ras 独立的 ERR 激活”Nature Cell Biol。

Sasaki A, Inagaki-Ohara K, Yoshida T, et al.: "The N-terminal truncated isoform of SOCS3 translated from an alternative initiation AUG codon under stress conditions is stable due to the lack of a major ubiquitination site, Lys-6."J Biol Chem.. 278. 2432-2

Sasaki A、Inagaki-Ohara K、Yoshida T 等人：“由于缺乏主要泛素化位点 Lys-6，在应激条件下从替代起始 AUG 密码子翻译而来的 SOCS3 N 端截短亚型是稳定的。

Sasaki A, Taketomi T, Kato R, Saeki K, et al.: "Mammalian Sprouty4 suppresses Ras-independent ERK activation by binding to Raf1"Nature Cell Biol. (印刷中).

Sasaki A、Taketomi T、Kato R、Saeki K 等人：“哺乳动物 Sprouty4 通过与 Raf1 结合抑制 Ras 独立的 ERK 激活”Nature Cell Biol。