JAPキナーゼ抑制因子JAB1及びJAB2の作用機序と生理機能の解明

阐明JAP激酶抑制剂JAB1和JAB2的作用机制和生理功能

• 批准号: 02J08744
• 负责人: 佐々木 敦朗
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J08744/
• 关键词: チロシンキナーゼ; FGF受容体; Ras; MAPキナーゼ; EGF受容体; Raf; 細胞膜; シグナル伝達

サイトカインは受容体の細胞内ドメインに会合するJAKチロシンキナーゼを介して細胞内にシグナルを伝える。STATはそのシグナルを核へ伝える重要な転写因子のひとつである。さらにRasも活性化され、シグナル伝達系できわめて重要な位置を占める。RasはC末を脂質で修飾されており細胞膜に存在し増殖因子など様々な外界の刺激で活性化される。活性化されたRasは主にRafを細胞膜にリクルートしそこでRahはりん酸化(特にセリン388)され活性化される。活性化されたRafはMEKを、MEKはMAPキナーゼを活性化するカスケードを形成する。このようにRas/MAPキナーゼ経路の正のシグナル経路は近年かなりの理解が進んだが負の制御メカニズムに関しては未だ不明な点が多い。最近ショウジョウバエでチロシンキナーゼ/MAPキナーゼ系の制御因子としてSproutyが同定され我々はほ乳類で4種類のSprouty分子があること、類似したSpred分子が存在することを見い出した。そのうち少なくともSprouty2,Sprouty4はEGF、FGF、フォルボールエステルなどの刺激によってMAPキナーゼを介して転写誘導された。興味深いことにSproutyはVEGFによるMAPキナーゼの活性化を抑制するものの、EGFによるMAPキナーゼ活性化には影響しない。Sprouty感受性と非感受性の経路がある。我々はSproutyのN末端に保存されたチロシン残基に注目し、これをフェニルアラニンに置換するとドミナントネガティブ型分子として作用し、FGFシグナルを増強することを発見した。Sproutyは複数の分子が一つの細胞に同時に発現していることが多いのでこの変異体はSproutyの哺乳類での生理機能を調べる上で有用と考えられる。この変異体はSpredには影響しなかったのでSpredとSproutyは別の分子機構でRas/Rafの活性化を抑制しているものと考えられる。SproutyがMAPキナーゼをどのようにして抑制するのか、あるいはそれ以外のシグナル経路にどのように影響するのか今後解析したい。

サイトカインは Receptor Intracellular ドメインに合するJA Kチロシンキナーゼを开して intracellular にシグナルを伝える. STATはそのシグナルをkernelへ伝えるimportantな転WRITE Factorのひとつである.さらにRasもactivationされ、シグナル伝大组できわめてimportant positionをoccupyめる. Ras is a lipid that modifies the cell membrane and is activated by external stimulation due to the presence of proliferative factors. Activated されたRasは主にRafをCell membrane にリクルートしそこでRahはりんAcidified (Special にセリン388) されActivated される. Activated されたRafはMEKを, MEKはMAPキナーゼをactivated するカスケードを formed する.このようにRas/MAPキナーゼ経路の正のシグナル経路は in recent yearsかなりのUnderstandingが enterんだがnegativeのcontrolメカニズムに关しては无だ无码な点が多い. Recently, the control factor of the system of ショウジョウバエでチロシンキナーゼ/MAPキナーゼとしてSproutyが同定されI 々はほでで4 types of のSprouty molecules があること, similar したSpred molecules がexistent することを见い出した.そのうち小なくともSprouty2,Sprouty4はEGF,FGF,フォルボールエステルなどのstimulating によってMAPキナーゼを Introduction して転WRITE inducing された. The interest is deep and active, VEGF is active and inhibits MAP, and EGF is active and affects MAP. Sprouty is sensitive and non-sensitive. The N-terminal part of my Sprouty is saved, and the residue of the N-terminal part is kept. Change the するとドミナントネガティブ type molecule として Effect し, FGF シグナルを Increase Strength することを発见した. Sproutyはpluralのmoleculeが一つのcellにsimultaneousに発appearしていることが多いのでこの変 heterogeneous body は Sprouty の mammal で の physiological function を べ る on で useful と test え ら れ る.この変Allogeneic SpredにはInfluenceしなかったのでSpredとSproutyはdifferentのmolecule mechanismでRas/RafのActivationをInhibitionしているものとKaoえられる. SproutyがMAPキナーゼをどのようにして Suppressionするのか、あるThe いはそれのシグナル経路にどのように affects the するのか future analysis したい.

项目成果

Sasaki A, Inagaki-Ohara K, Yoshida T, et al.: "The N-terminal truncated isoform of SOCS3 translated from an alternative initiation AUG codon under stress conditions id stable due to the lack of a major ubiquitination site, Lys-6"J Biol Chem. 278. 2432-243

Sasaki A、Inagaki-Ohara K、Yoshida T 等人：“由于缺乏主要泛素化位点 Lys-6，在应激条件下从替代起始 AUG 密码子翻译而来的 SOCS3 N 端截短亚型保持稳定”

Sasaki A, Taketomi T, Kato R, Saeki K, et al.: "Mammalian Sprouty4 suppresses Ras-independent ERR activation by binding to Raf1"Nature Cell Biol. 5. 427-432 (2003)

Sasaki A、Taketomi T、Kato R、Saeki K 等人：“哺乳动物 Sprouty4 通过与 Raf1 结合抑制 Ras 独立的 ERR 激活”Nature Cell Biol。

Endo T, Sasaki A, Minoguchi M, et al.: "CIS1 interacts with the Y532 of the Prolactin Receptor and Suppresses Prolactin-Dependent STAT5 Activation"J.Biochem. 133. 109-113 (2003)

Endo T、Sasaki A、Minoguchi M 等人：“CIS1 与催乳素受体的 Y532 相互作用并抑制催乳素依赖性 STAT5 激活”J.Biochem。

Sasaki A, Inagaki-Ohara K, Yoshida T, et al.: "The N-terminal truncated isoform of SOCS3 translated from an alternative initiation AUG codon under stress conditions is stable due to the lack of a major ubiquitination site, Lys-6."J Biol Chem.. 278. 2432-2

Sasaki A、Inagaki-Ohara K、Yoshida T 等人：“由于缺乏主要泛素化位点 Lys-6，在应激条件下从替代起始 AUG 密码子翻译而来的 SOCS3 N 端截短亚型是稳定的。

Sasaki A, Taketomi T, Kato R, Saeki K, et al.: "Mammalian Sprouty4 suppresses Ras-independent ERK activation by binding to Raf1"Nature Cell Biol. (印刷中).

Sasaki A、Taketomi T、Kato R、Saeki K 等人：“哺乳动物 Sprouty4 通过与 Raf1 结合抑制 Ras 独立的 ERK 激活”Nature Cell Biol。