ミカンキジラミによるカンキツグリーニング病媒介機構に関する研究

柑橘雉传播柑橘黄龙病的机制研究

• 批准号: 02J20004
• 负责人: 大西 純
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Agricultural Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J20004/
• 关键词: ミカンキジラミ; カンキツグリーニング病; 虫媒機構; 昆虫伝搬; 細菌病; 植物病理学

昨年度までに、実験的にカンキツグリーニング(Citrus Greening:CG)細菌を保毒させた虫を得る「獲得吸汁法」を確立しており、高率に保毒した個体群を安全に得ることが可能となった。この方法により供給された保毒虫を用いて、今年度は(1)CG細菌の虫体内における増殖性、(2)in situ hybhdization(ISH)法によるCG細菌の局在部位の解析、(3)CG細菌とキジラミ体内共生細菌との局在部位の相互比較を行った。(1)CG細菌の虫体内における増殖性吸汁行動中に変化するCG細菌濃度をReal-time PCR法により定量解析した。最大細菌濃度とその到時間を幼虫と成虫で比較した結果、最大細菌濃度は同程度だか幼虫は短時間に急速に吸汁し、細菌を獲得していることが判明した。一方で、吸汁後に健全植物体上で生育維持し、吸汁後の濃度変化を解析した。成虫では吸汁後から徐々に濃度が低下した。幼虫では羽化成虫後に増加し、細菌が定着・増殖して永続的な伝搬を可能にしていることが示唆された。(2)ISH法によるCG細菌の局在部位の解析吸汁中に進入したCG細菌は、虫体内に定着し永続的に維持されることより、ISH法によりその局在部位の検出を試みた。保毒成虫個体を観察した結果、副唾液腺組織にのみ明瞭なシグナルが認められたが、反応の特異性は低かった。同組織への局在性が示唆されるが、本法の更なる改良により最終的な確認が必要である。(3)CG細菌とキジラミ共生細菌との局在部位共生細菌は腹部の菌細胞という特異な構造物中とその周辺部に局在し、保毒虫、健全虫ともに同じ局在性を示し菌細胞数にも大きな違いが見られなかった。病原細菌と共生細菌との直接的な相互作用はないように思われるが、CG細菌の定着・増殖によるキジラミへの生理的変化など、間接的な影響を今後詳細に検討する必要があると思われる。

In the past year, the number of bacteria in the virus has been increased.(Citrus Greening:CG) The number of bacteria in the virus has been increased. The number of bacteria in the virus has been increased. This method is applied to (1) the reproduction of CG bacteria in vivo,(2) the analysis of CG bacteria in situ hybridization (ISH),(3) the comparison of CG bacteria in situ symbiotic bacteria in vivo. (1)CG The concentration of CG bacteria was quantified by Real-time PCR during the reproductive suctioning of bacteria. The maximum bacterial concentration is determined by comparing the results of the larvae and adults with the maximum bacterial concentration. A side, after suctioning, healthy plant growth maintenance, suctioning, concentration change analysis The adult suckles the juice and the concentration is low. The larvae grow after emergence, and the bacteria grow. (2) The ISH method is used to detect the presence of CG bacteria in the analysis and absorption of juice. The results of individual observation and identification of salivary gland tissues are low and the specificity of anti-virus is low. The same organization is in existence, the law is improved, the final confirmation is necessary, (3)CG The bacteria and symbiotic bacteria in the site symbiotic bacteria in the abdomen of the bacteria cells in the specific structure in the peripheral part of the site in the protection of insects, healthy insects, the same site in the number of bacteria cells in the large number of violations The direct interaction between pathogenic bacteria and symbiotic bacteria is necessary for future detailed discussion on the physiological changes and indirect effects of CG bacteria on colonization.