小児悪性腫瘍の発症機構と転写因子による細胞の分化制御

儿童恶性肿瘤的发生机制及转录因子对细胞分化的调控

• 批准号: 13670783
• 负责人: 峯岸 直子
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13670783/
• 关键词: 幹細胞; 転写因子; 小児悪性腫瘍; 白血病; トランスジェニックマウス; 遺伝子発現調節; GATA因子

マウスGATA-2遺伝子の発現制御領域に緑色蛍光蛋百質(GFP)遺伝子をつなぎマウスに導入したトランスジェニックマウス,および,GATA-2遺伝子の翻訳開始部位にGFP遺伝子を挿入したマウス(ノックインマウス)を作成し,胎児期の造血を解析した.このノックインマウスではGATA-2を発現すべき細胞がGFPの蛍光によって標識される.また,ホモ体では正常GATA-2遺伝子の発現は消失し,ヘテロ体ではGATA-2mRNAの発現は正常の半量程度に減少している.成人の血液細胞は胎児期の大動脈壁の細胞から生まれるとされるが,これらトランスジェニックマウスやノックインマウスでは,この時期の大動脈壁に蛍光を発する細胞が見られ,免疫染色によりこれらの細胞における内在性GATA-2蛋白質の発現が確認された.これらの細胞を培養したところ高率に血液細胞に分化し,GATA-2が血液細胞を生み出す前駆細胞に発現していることが示された.そこで,胎仔大動脈壁細胞の培養系を用いてレトロウィルスによるGATA-2強制発現実験を行い,GATA-2が分化抑制に働くことを明かにし,この活性に必要なGATA-2のドメインを決定した.さらに,ノックインマウスでは,ホモ,ヘテロ体ともに,発生の初期には野生型に比べて血液細胞が多いものの,その後,成人型造血の確立に重要な時期に血液細胞への分化能をもつ細胞が減少することを見出した.これは,GATA-2の発現低下に伴う脱抑制により未熟な発生段階において血液細胞への分化が進み,造血幹細胞分化に必要な環境が整う時期には血液細胞の前駆となる細胞が枯渇してしまうためと考えられた.(Blood投稿中)このほかに白血病細胞株と正常骨髄細胞を使ったGATA-2標的遺伝子の研究,GATA-2蛋白質の翻訳後修飾,転写活性化の機構等についての研究を行っている.

GATA-2 gene development control field green fluorescent protein (GFP) gene development control field GFP gene development field GFP This patch is marked by the light of GFP in GATA-2-producing cells. However, the expression of GATA-2mRNA was reduced to half the normal level. Adult blood cells were identified by immunostaining for the intrinsic GATA-2 protein in fetal arterial wall cells. The high rate of differentiation of blood cells in the culture of these cells,GATA-2, and the development of blood cells in the production of these cells, was demonstrated. GATA-2 stress was observed in cultured fetal arterial wall cells, and GATA-2 differentiation inhibition was observed. In the early stages of development, there are more blood cells than wild-type cells, and later, there are fewer blood cells than wild-type cells at the important stage of establishment of adult-type hematopoiesis. However,GATA-2 expression is low, accompanied by de-inhibition, immature development stage, blood cell differentiation is advanced, hematopoietic stem cell differentiation is necessary environment, whole stage, blood cell differentiation is advanced, blood cell differentiation is dead. (Blood submission) This article focuses on the study of GATA-2 target gene in leukemia cell lines and normal bone cells, post-translational modification of GATA-2 protein, and the mechanism of activation.

项目成果

Hirasawa R, Shimizu R, Minegishi N, et al.: "Essential instructive roles of GATA factors in eosinophil development"Journal of Experimental Medicine. 195. 1379-1386 (2002)

Hirasawa R、Shimizu R、Megishi N 等人：“GATA 因子在嗜酸性粒细胞发育中的重要作用”实验医学杂志。

Minegishi N, Suzuki N, Yokomizo T, et al.: "Expression and domain-specific function of GATA-2 during differentiation of the hematopoietic precursor cells in midgestation mouse embryos"Blood. (in press). (2003)

Minegishi N、Suzuki N、Yokomizo T 等人：“妊娠中期小鼠胚胎造血前体细胞分化过程中 GATA-2 的表达和域特异性功能”血液。

Ezoe S, Matsumura I, Minegishi N, et al.: "GATA-2 regulates cytokine-dependent growth of hematopoietic cells through accumulation of p21^<WAF1> and p27^<Kip1> proteins"Blood. 100. 3512-3520 (2002)

Ezoe S、Matsumura I、Minegishi N 等人：“GATA-2 通过 p21^<WAF1> 和 p27^<Kip1> 蛋白的积累调节造血细胞的细胞因子依赖性生长”血液。

Umetani, M., Mataki, C., Minegishi, N. et al.: "Function of GATA transcription factors in induction of endothelial vascular cell adhesion molecule-1 by tumor necrosis factor-alpha"Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol.. 21. 917-922 (2001)

Umetani, M.、Mataki, C.、Megishi, N. 等人：“GATA 转录因子在肿瘤坏死因子-α 诱导内皮血管细胞粘附分子-1 中的功能”Arterioscler。