圧負荷心における変異型MCP-1遺伝子導入による心筋線維化・拡張障害の防止

通过将突变型MCP-1基因引入压力负荷心脏来预防心肌纤维化和舒张障碍

• 批准号: 13770373
• 负责人: 桑原 史隆
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770373/
• 关键词: 圧負荷肥大心; 心リモデリング; 左室拡張心不全; 心筋線維化; 炎症細胞浸潤; MCP-1; TGF-β; 7ND MCP-1変異型遺伝子; 心不全

1)ドミナントネガティブMCP-1 7ND変異遺伝子の作成と投与:前年度の研究にて腹部大動脈縮窄による圧負荷肥大心には心筋線維化リモデリングに先行した炎症・細胞増殖反応が惹起し、慢性期には左室拡張障害を来した。また、MCP-1/TGF-βの介在を確認した。そこでドミナントネガティブ活性を持ち得るMCP-1 7ND変異遺伝子による心筋線維化リモデリングの抑制効果を検討した。まず、ドミナントネガティブMCP-1 7ND変異遺伝子はhuman 7ND cDNAをPCRにて増幅後、wild type MCP-1 cDNAをtemplateとしvector plasmidを用いて作成した。MCP-1 7ND変異遺伝子は圧負荷ラットモデルの1日目・14日目にnaked plasmidの状態で下肢骨格筋に投与した。対照モデルはPBSを投与した。2)MCP-1 7ND変異遺伝子投与における心リモデリングの評価:7ND変異遺伝子投与後、第28日目の評価にて心筋線維化率は約60%の減少したが心筋細胞肥大に有意差はなかった。また、左室収縮能には対照群と変化はなかったが、圧負荷群で認められた左室拡張能(E/A比低下・LVEDP上昇)はMCP-1 7ND変異遺伝子投与において著しく改善した。3)炎症細胞浸潤・細胞増殖の検討:MCP-1 7ND変異遺伝子投与により圧負荷早期の心筋内に浸潤するMφは著明に抑制をうけた。更に、間質の線維芽細胞の増殖が抑制された。4)TGF-βの関与の検討:MCP-1 7ND変異遺伝子投与群の圧負荷心においてTGF-β mRNAおよび蛋白発現の抑制効果を認め、心筋線維性リモデリングでの関与が示唆された。現在、慢性期圧負荷心モデル(Dahl rat)にての検討が進行中である。これにより、慢性圧負荷心疾患にての心筋線維性リモデリングおよび拡張不全の遺伝子治療可能性が示唆される。

1) The development of MCP-1 7ND variant gene and its application: previous year's study showed that abdominal arterial constriction, pressure load and hypertrophy of the heart caused by cardiovascular disease, inflammation, cell proliferation and anti-inflammatory reaction, and left ventricular dysfunction in chronic stage. MCP-1/TGF-β was identified. The inhibition effect of MCP-1 7ND on the activity of the protein was investigated. The wild type MCP-1 cDNA template and vector plasmid were amplified by PCR from human 7ND cDNA. MCP-1 7ND differential transmission of the lower limb bone muscle in the state of naked plasmid on the 1st and 14th day For example, if you want to use PBS, 2)MCP-1 7ND variant gene injection and heart failure evaluation:7ND variant gene injection and evaluation on the 28th day, the maintenance rate of cardiac muscle line decreased by about 60% Left ventricular systolic energy (E/A ratio decreased·LVEDP increased) MCP-1 7ND differential energy (E/A ratio decreased·LVEDP increased) 3)Inflammatory cell infiltration and cell proliferation:MCP-1 7ND gene expression and inhibition of myocardial infiltration in the early stages of stress In addition, the proliferation of mesenchymal cells was inhibited. 4)TGF-β mRNA and protein expression inhibition effect of MCP-1 7ND gene expression and protein expression inhibition effect of MCP-1 7ND gene expression and protein expression inhibition effect of MCP-1 7ND gene expression. Currently, the investigation of chronic stress load is ongoing. These findings suggest that cardiovascular disease due to chronic stress may be associated with a variety of cardiovascular diseases, such as heart failure and incomplete gene therapy.

项目成果

Kuwahara F, (他6名1番目): "Hypoxia-inducible factor/vascular endothelial growth factor-mediated pathway for adventitial vasa vasorum formation in hypertensive aorta"Hypertension. 39(2). 46-50 (2002)

Kuwahara F，（其他 6 人，第 1）：“高血压主动脉外膜血管滋养层形成的缺氧诱导因子/血管内皮生长因子介导的途径”39(2) (2002)。

Fumitaka Kuwahara: "Transforming Growth Factor-β Function Blocking Prevents Myocardial Fibrosis and Diastolic Dystunction in Pressure-Overloaded Rats"Circulation. 106. 130-135 (2002)

Fumitaka Kuwahara：“转化生长因子-β 功能阻断可预防压力超负荷大鼠的心肌纤维化和舒张功能障碍”循环。 106. 130-135 (2002)

Kuwahara F, (他8名1番目): "Coexistence of hypercholesterolemia and hypertension impairs adventitial vascularization"Hypertension. 39(part2). 455-459 (2002)

Kuwahara F，（其他 8 人，第 1）：“高胆固醇血症和高血压的共存损害外膜血管化”高血压 39（第 2 部分）。