アルコール・薬物依存の神経細胞障害と防御機構におけるカルシウムとアネキシンの役割

钙和膜联蛋白在酒精/药物依赖引起的神经元损伤和防御机制中的作用

• 批准号: 13770555
• 负责人: 橋本 恵理
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770555/
• 关键词: エタノール; 依存; アネキシンIV; 薬物; 強制発現; 自己抗体; アルコール; カルシウムイオン

アルコール・薬物依存におけるCa^<2+>・リン脂質結合蛋白質アネキシンの役割に関して、分子生物学的手法を用いて、特に薬物暴露による細胞障害性の観点から検索することを目的とした。アネキシンIVの発現量がエタノール暴露した培養細胞において増大することは既に明らかにしたが、MTT法で細胞障害が認められない濃度のエタノール(50mM)暴露時にもアネキシンIV発現量は対照群に比べて増大し、エタノールの直接の影響でアネキシンIVが発現変化を起こすことが示唆された。次に、アネキシンIV-DNAをトランスフェクトして強制発現を行った細胞を用いて、アネキシンIVの発現変化とエタノールによる細胞障害との関連を検討した。C6細胞ではアネキシンIVの強制発現でエタノールによる細胞障害性の増大が認められた。海馬の初代神経細胞でも同様にアネキシンIVの強制発現を行い、アネキシンIVの発現増大によりエタノールによる細胞障害活性が上昇することが示された。一方、エタノール非添加時にはアネキシンIVの強制発現による細胞障害性は認められなかった。したがって、アネキシンIVはエタノール暴露下においてエタノールによる細胞障害性を増強する働きをもつことが示唆された。既にヒト死後脳において、アルコール依存症群の海馬領域でのアネキシンIVの有意な増加を認めているが、本研究での培養細胞におけるエタノール暴露下のアネキシンIV発現量増大との結果と矛盾しない所見と考えられる。また、今回培養細胞で得られた知見をヒト-アルコール依存症の病態理解へと還元する試みとして、ヒト血清中でのアネキシン自己抗体を測定した。アルコール依存症者の末梢血において、健常者に比べてより高い抗体価の抗アネキシンIV自己抗体の存在が明らかになり、アネキシンIVがアルコール依存症の生物学的マーカーとなる可能性が示唆された。

ア ル コ ー ル · 薬 content dependent に お け る Ca ^ 2 + < >, リ ン lipid binding protein ア ネ キ シ ン の service cut に masato し て, the technique of molecular biology を い て, に 薬 content exposed に よ る cells handicap of sexual の 観 point か ら 検 cable す る こ と を purpose と し た. ア ネ キ シ ン IV の 発 now quantity が エ タ ノ ー ル exposed し た culture cell に お い て raised large す る こ と は both に Ming ら か に し た が, determined by MTT method で cells handicap of が recognize め ら れ な い concentration の エ タ ノ ー ル (50 mm) exposed に も ア ネ キ シ ン IV は 発 now quantity according to the group of seaborne に than べ て raised し, エ タ ノ ー ル の の directly affect で ア ネ キ シ ン IVが undergoes a transformation from を to <s:1> す とが and then to された. に, ア ネ キ シ ン IV - DNA を ト ラ ン ス フ ェ ク ト し て forced 発 line now を っ た cells を using い て, ア ネ キ シ ン IV の 発 now - the と エ タ ノ ー ル に よ る cells handicap of と の masato even を beg し 検 た. C6 cells で, で, アネキシ, <s:1>, IV <s:1> are forced to develop でエタノ, <s:1>, による, and the cell impairment <s:1> increases が recognition められた. Hippocampal の original god 経 cells で も with others に ア ネ キ シ ン IV の forced 発 now line を い, ア ネ キ シ ン IV の 発 now raised large に よ り エ タ ノ ー ル に よ る が handicap of activity rise す る こ と が shown さ れ た. One party, エタノ エタノ エタノ エタノ エタノ に <s:1> アネキシ <e:1> <s:1> IV, will forcibly present による cell impairment <s:1> recognition められな った った った when not added. し た が っ て, ア ネ キ シ ン IV は エ タ ノ ー ル exposure に お い て エ タ ノ ー ル に よ る cells handicap of sexual を raised strong す る 働 き を も つ こ と が in stopping さ れ た. After the death of both に ヒ ト 脳 に お い て, ア ル コ ー ル dependent disease group の hippocampal areas で の ア ネ キ シ ン IV の intentionally な raised plus を recognize め て い る が, this study で の culture cell に お け る エ タ ノ ー ル exposure の ア ネ キ シ ン IV 発 now amount raised large と の results と contradiction し な と い see exam え ら れ る. ま た, today back to cultivate cells で ら れ た knowledge を ヒ ト - ア ル コ ー の ル dependent disease pathological understanding へ と also yuan す る try み と し て, ヒ ト serum で の ア ネ キ シ ン their antibody を determination し た. ア ル コ ー ル dependent disease is の peripheral blood に お い て, health often に than べ て よ り high い antibody 価 の resistance ア ネ キ シ ン IV が antibody の existence Ming ら か に な り, ア ネ キ シ ン IV が ア ル コ ー ル dependent disease の biology マ ー カ ー と な が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Shichinohe, S.: "Changes in the cAMP-related signal transduction mechanism in postmortem human brains of heroin addicts"J Neural Transm. 108. 335-347 (2001)

Shichinohe, S.：“海洛因成瘾者死后人脑中 cAMP 相关信号转导机制的变化”J Neural Transm。

Sohma, S., Hashimoto, E.et al.: "Ethanol-induced augmentation of annexin IV expression in rat C6 glioma and human A549 adenocarcinoma cells"Alcohol Cli Exp Res. 26・8. 44S-48S (2002)

Sohma, S., Hashimoto, E. 等人：“乙醇诱导的大鼠 C6 神经胶质瘤和人 A549 腺癌细胞中膜联蛋白 IV 表达的增强”Alcohol Cli Exp Res 26・8（2002）。

齋藤利和: "アルコール依存の生物学的マーカー"日本アルコール精神医学雑誌. 7・2. 49-54 (2001)

Toshikazu Saito：“酒精依赖的生物标记”《日本酒精精神病学杂志》7·2（2001）。

Ohkawa, H., Hashimoto, E.et al.: "Ethanol-induced augmentation of annexin IV in cultured cells and the enhancement of cytotoxicity by overexpression of annexin IV by ethanol"Biochim Biophys Acta. 1588. 217-225 (2002)

Ohkawa, H., Hashimoto, E.等人：“乙醇诱导的培养细胞中膜联蛋白 IV 的增强以及通过乙醇过度表达膜联蛋白 IV 来增强细胞毒性”Biochim Biophys Acta。

齋藤利和, 橋本恵理: "アルコール依存症の生物学的研究とその臨床的応用"精神神経学雑誌. 104. 191-200 (2002)

Toshikazu Saito、Eri Hashimoto：“酒精中毒的生物学研究及其临床应用”《精神病学和神经病学杂志》104. 191-200 (2002)。