ビタミンD受容体のリガンド結合能獲得機構における分子シャペロン系の関与

分子伴侣系统参与维生素D受体配体结合能力获取机制

• 批准号: 13770638
• 负责人: 森島 嘉宏
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770638/
• 关键词: 分子シャペロン; ステロイドホルモン受容体; ビタミンD; hsp70

ステロイドホルモンが標的細胞でその機能を発現するにはまずその受容体との結合が必要となる。グルココルチコイド受容体(GR)、プロゲステロン受容体(PR)においては、脂溶性リガンドとの結合能を獲得するためには受容体が合成された後にhsp90をはじめとする分子シャペロン系の協調作用によりステロイド結合領域の疎水性部位が開かれることが必要である。一方、ステロイドホルモン受容体に属するビタミンD受容体(VDR)がリガンドと結合する際に同様の機構が関与し、受容体の構造および機能の変化がもたらされるかは明らかではない。今回の研究ではVDRがリガンドとの結合能を獲得する過程にGRやPRにおけるのと同様な分子シャペロン系の作用機構が存在しているかどうか生化学的なアプローチを試みた。従来VDRが細胞の粗抽出液中では非常に不安定な蛋白質であると報告されてきたが、これまでの研究により、免疫沈降法で生成されたVDRは生理的温度ではリガンド結合能を失わず非常に安定であることが分かった。また、熱変性を受けてリガンド結合能が失われたVDRがウサギreticnlocyte lysate(RL)によりリガンド結合能が復元されることを示す実験系、reticulocyte lysate renaturation systemを確立し、この復元がATP依存的、K^+依存的な現象であること、また、この実験系の作用にはhsp70が必須であることを見い出した。一方、この実験系ではGRで得られた結果とは異なり、hsp90は関与していないと考えられた。さらに、RLに含まれる、hsp70以外の何らかの因子がこの系に関与しており、hsp70の機能に対し触媒的に作用することを示唆する実験結果も得た。また、実験結果からhsp70の内在性ATPaseを触媒的に活性化することが知られるhsp40がこの候補に挙げられることが強く示唆された。今後はGRやPRなどで一般的に用いられている受容体の過剰発現系を用い、さらに研究を発展させたい。

It is necessary for the function of target cells and the combination of receptors and receptors.グルココルチコイド receptor (GR), プロゲステロン receptor (PR)においては, fat-soluble リガンドとのbinding energy するためには acceptor が合The coordinating effect of the hsp90 をはじめとする molecular シャペロン system after becoming a されたによりステロイドThe combination of the water-based parts of the field and the necessary opening of the かれることがである. One side, Structural Receptor (VDR) Receptor (VDR) Combined Receptor The structure and function of the recipient body are related to each other. This time's research is about VDR's combination energy and acquisition process, GR and PR, and the same process.様なmolecule シャペロンsystem's action mechanism がexistent しているかどうかbiochemical なアプローチをtest みた. Report on the extremely unstable protein in the crude extract of VDR cells and research on it , immunosedimentation method does not generate the physiological temperature of the VDR, the binding energy is very stable, and the binding energy is very stable.また、热変性を被けてリガンドcombination energy がlossわれたVDRがウサギreticnlocyte lysate(RL)によりリガンドcombination energyがrestorationされることをshowす実験system, reticulocyte lysate renaturation System is established and restored, ATP-dependent and K^+-dependent phenomena are established.こと, また, この実験式の Effect にはhsp70がmust であることを见い出した. One side, the この実験 system ではGR でget られた results とはdifferent なり, hsp90 は关 and していないと卡えられた.さらに, RL に contain まれる, hsp70 other than のらかのfactor がこの线に关与しておThe functions of hsp70 and the role of the catalyst are the same as the results.また、実験 Results からhsp70のActivation of intrinsic ATPase catalyst することが知られるhsp40がこの candidateに挙げられることが强くshows instigationされた. From now on, the general use of GR and PR will be improved, and the receiver will be used and researched.

项目成果

Murphy, P.J.M.: "Stoichiometry, abundance, and functional significance of the hsp90/hsp70-based multiprotein chaperone machinery in reticulocyte lysate"Journal of Biological Chemistry. 276. 30092-30098 (2001)

Murphy, P.J.M.：“网织红细胞裂解液中基于 hsp90/hsp70 的多蛋白伴侣机制的化学计量、丰度和功能意义”生物化学杂志。

Patt, W.B.: "Role of Molecular Chaperones in Steroid Receptor Action in Essays in Biochemistry"Portland Press, London, U.K.. 20 (2003)

Patt, W.B.：“生物化学论文中类固醇受体作用中分子伴侣的作用”波特兰出版社，伦敦，英国。20 (2003)