ホルモン抵抗性前立腺癌の成因と増殖における細胞内生存シグナル活性化に関する研究

激素抵抗性前列腺癌病因和增殖中细胞内生存信号激活的研究

• 批准号: 13770885
• 负责人: 佐藤 文憲
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770885/
• 关键词: 前立腺癌; LNCaP; PC3; テストステロン; ホルモン抵抗性; Akt

【目的】前立腺癌細胞の生存と増殖には細胞内生存シグナルAkt/Protein kinase B(Akt)の活性化が極めて重要と考えられているがその詳細は不明である。血清除去および低テストステロン培地におけるPC3とLNCaPのAkt活性化とその意義について検討した。【方法】LNCaPをチャコール処理したテストステロン除去培地(CSS)で,PC3を無血清培地(S(-))で培養し,Akt寸活性化をantiphospho. Akt抗体(p-Akt-Ser473:New England biolab.)を用いたWesten blottingによって解析し,生存細胞数の測定とWST-1アッセイによる細胞増殖能の検討を行い,さらにヘキスト33342染色による細胞形態変化につき検討した。【結果】LNCaP-CSSは24時間でリン酸化Akt量が増加し,この状態は7日めも持続していた。PC3-S(-)は24時間でリン酸化Aktが著明に増加し,その後低下した。これらのAktリン酸化はPI3K阻害剤(LY294002)の添加によって著明に抑制された。LNCaP-CSSとPC3-S(-)にLY294002を添加することにより細胞数は著明に減少し,細胞増殖は抑制され,形態的にアポトーシス細胞の増加を認めた。【考察】LNCaPとPC3はそれぞれテストステロンあるいは細胞外因子に依存しないAkt活性化の系を有している。これらの結果より,Akt活性化が前立腺癌細胞におけるホルモン除去後の生存と増殖に促進的に作用していると推察され,Aktはホルモン抵抗性前立腺癌治療の標的分子となりうると考えられた。

[Objective] The activation of Akt/Protein kinase B(Akt) is very important for the survival and proliferation of advanced adenocarcinoma cells. Serum removal and low temperature test results in PC3 and LNCaP Akt activation [Method] LNCaP was treated with antiphospho. Akt antibody (p-Akt-Ser473:New England biolab.) The number of viable cells was determined by Westen blotting analysis, and the cell proliferation ability was studied by WST-1 staining. The cell morphology was studied by 33342 staining. [Results] LNCaP-CSS increased in 24 days, and maintained in 7 days. The PC3-S(-) has been increasing for 24 hours, but it has been decreasing since then. The addition of PI3K inhibitor (LY294002) to the Akt acid solution was inhibited by the addition of a light inhibitor. LNCaP-CSS and PC3-S(-) were added to LY294002 to decrease cell number, inhibit cell proliferation, and increase cell morphology. [Investigation] LNCaP and PC3 are dependent on extracellular factors and Akt activation. Akt activation is a target molecule for the treatment of resistant prostate cancer cells.