蝸牛聴覚に及ぼす上頸神経節由来交感神経の役割についての形態学的、電気生理学的研究

颈上神经节衍生交感神经在耳蜗听力中作用的形态学和电生理学研究

• 批准号: 13770952
• 负责人: 柴森 良之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770952/
• 关键词: 交感神経; 蝸牛; 聴覚; 上頚神経節; 形態学; 電気生理学

内耳内交感神経線維を形態学的に観察するために動物はSprague-Dawley ratを使用(1)免疫組織化学蝸牛の交感神経線維を標識するために、麻酔後、環流固定し、側頭骨を脱灰、切片を作成、一次抗体にカテコーラミン合成酵素(tyrosine hydroxylase)を用い、蝸牛内の交感神経節後線維を発色させ交感神経線維を観察した結果、蝸牛内交感神経線維は、2種類存在し、それぞれ血管壁周囲に終末するもの(vessel dependent fibers)と骨らせん板縁で遠心性蝸牛神経の無髄軸索領域で終末するもの(vessel independent fibers)に分けられ、それぞれの機能面を含め興味深い結果であった。(2)実験動物の作成交感神経節由来であることを確認するために一側の上頚神経節を摘出、その後の変化を蝸牛内で調べた結果、ほとんどの蝸牛内交感神経線維は向側の上頸神経節由来であることが分かった。内耳交感神経が内有毛細胞とコリン作動性神経のシナプス形成に与える影響を調べるために生後3日目のラット右上頚神経節を摘出、生後7日目に深麻酔下に、Zamboni液で潅流固定、蝸牛を摘出、脱灰切片を作製した。共焦点レーザー顕微鏡でのコリン神経終末を観察、コリン作動性神経終末のマーカーとしてvesicular acetylchdine transporter(VAT)抗体を使用、有毛細胞とのシナプスの位置関係を確認するために有毛細胞をCalbindin-D抗体を用いて標識した。VATの反応は3列の外有毛細胞では基底側に、内有毛細胞においては細胞側壁に見られた。上頚神経節除去側において内有毛細胞基底部でVAT反応のばらつきが見られシナプス形成に影響を及ぼすことが推測できた。

为了从形态上观察内耳的交感神经纤维，动物使用了sprague-dawley大鼠（1）免疫组织化学来标记耳蜗的交感神经纤维，在麻醉后将患者反流，并在暂时的骨骼上进行了脉冲，并使用了co虫，并将其纳入了co骨，并将其用于co;观察到交感神经纤维。有两种类型的chochlea交感神经纤维分为两种类型的chochlea交感神经纤维，以及传出的耳蜗神经（依赖血管纤维）的递送轴突区域，结果很有趣，包括其功能方面。 （2）创建实验动物：为了确认它是源自交感神经节的，一侧被去除，随后在耳蜗中检查了随后的变化，发现大多数相对侧的交感神经神经节源自相对性的神经纤维。为了研究内耳交感神经对内毛细胞和胆碱能神经之间突触的影响，在生命的第三天，右上宫颈神经节被清除，在生命的第七天，在深度麻醉之下，灌注固定在Zamboni液体中，Zamboni液体被固定，胶囊被恢复了，并准备了脱水的宗派。在共聚焦激光显微镜上观察到胆碱能神经末端，囊泡乙酰基丁转运蛋白（VAT）抗体用作胆碱能神经末端的标志物，并用Calbindin-D抗体标记毛细胞，以确认与毛细胞的突触关系。在三排外毛细胞和内毛细胞的细胞侧壁上的基础侧看到了增值税响应。据推测，在上颈神经节去除侧的内毛细胞的底部观察到了增值税反应的变化，这会影响突触的形成。

项目成果

柴森良之: "蝸牛遠心性神経線維の発達と機能"Otologg Japan. 11(3). 179-183 (2001)

Yoshiyuki Shibamori：“耳蜗传出神经纤维的发育和功能”Otologg Japan 11(3) (2001)。