可溶性IL-12受容体を用いた半月体形成糸球体腎炎に対する遺伝子治療の検討

考虑使用可溶性 IL-12 受体基因治疗新月体肾小球肾炎

• 批准号: 14770566
• 负责人: 深水 圭
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770566/
• 关键词: 半月体系成腎炎; IL-12; 可溶性受容体; electroporation; Th1; Th2バランス; 半月体形成腎炎

半月体形成腎炎(CreGN)は、「臨床的には急速進行性糸球体腎炎を示し、種々の治療法を用いても急速に末期腎不全に至る予後不良の疾患群である。CreGNは細胞性免疫反応の結果生じる腎糸球体特有の活動性病変で、糸球体係蹄壁(GBM)の破綻と糸球体の壊死性変化、これに伴う高度の炎症細胞浸潤を主体とする。半月体形成の過程にT細胞による細胞性免疫、Th1/Th2バランスの異常が指摘されている。抗GBM腎炎モデルではIL-12投与で半月体形成が増悪する。また、IL-12やINF-γのノックアウトマウスに同腎炎を惹起しても半月体形成が誘導されない。よって半月体形成過程ではTh1優位細胞性免疫が重要で、IL-12はTh1誘導に中心的な役割を果たす。可溶性受容体はリガントと結合して本来の受容体への結合を阻止する中和物質として働く.これを生体内で過剰発現させて作用を遮断し病変形成の軽減効果を持つ可能性がある。今回、我々は、ラットIL-12の可溶性受容体遺伝子を組み込んだベクターを作製すること、また,抗GBM腎炎モデルラットに遺伝子導入することを検討した.前年度に引き続き、ラット抗GBM腎炎モデルに遺伝子導入を行い、半月体形成の抑制効果とTh1/TL2バランスに対する影響を検討した。1)遺伝子導入と発現の確認。pCAGGS-IL-12βR-IgGはラット筋肉に注入後、Electroporation法によって筋肉細胞に強制発現させた。発現の確認は計時的に採取した血清に対してIL-12受容体細胞外領域抗体を用いたウェスタンプロット法によって行った。2)抗GBM腎炎モデルへの遺伝子導入とTh1/Tb2バランスや半月体形成抑制への効果の検討を以下の方法で行った。遺伝子導入を行った群と対照群について、上記の免疫組織学的検索や末梢血におけるTh1/Th2バランスの検討を行い、さらに半月体形成を含む組織学的検討や腎機能検査によって、本法の有効性を総合的に検討した。

CGN is a clinical disease characterized by rapid progressive glomerulonephritis and its treatment. CreGN is the result of cellular immune response, which is characterized by active disease of the kidney, weakness of the hoof wall (GBM) of the kidney system, and death of the kidney, which is accompanied by high inflammatory cell infiltration. The process of semilunar body formation is related to T cell immunity, Th1/Th2 regulation and abnormal expression. Anti-GBM nephritis treatment can increase the formation of semilunar bodies by IL-12 administration. IL-12 and INF-γ may be involved in the induction of meniscus formation in nephritis. IL-12 plays an important role in Th1-mediated cellular immunity during semilunar formation. Soluble receptors combine to prevent the binding of natural receptors to neutral substances. The possibility of the occurrence of this disease in vivo and its effect on the formation of the disease is discussed. In this paper, we investigate the expression of IL-12 soluble receptor gene and its role in the prevention and treatment of GBM nephritis. To investigate the effects of gene introduction, inhibition of semilunar body formation, and Th1/TL2 gene introduction on anti-GBM nephritis in the past year 1)Confirmation of gene introduction and discovery. After pCAGGS-IL-12βR-IgG was injected into the muscle cells, the muscle cells were stressed by Electroporation method. The detection of IL-12 receptor extracellular domain antibodies by the use of anti-IL-12 antibodies 2)The following methods are used to investigate the effects of gene introduction and semistemal formation inhibition in anti-GBM nephritis: The study of gene introduction, immuno histologic examination, peripheral blood Th1/Th2 screening, semilunar formation, histological examination, renal function examination, and effective combination of these methods.

项目成果

Fukami K, et al.: "Advanced Glycation Endproducts and their receptor interactoion promotes mesangial cell damage via angiotensin II and TGF-β"J.Am Soc Nephrology. 13. 654A (2002)

Fukami K 等人：“高级糖化终产物及其受体相互作用通过血管紧张素 II 和 TGF-β 促进系膜细胞损伤”J.Am Soc Nephrology 13. 654A (2002)。

深水 他: "AGE-RAGE systemにおける細胞傷害機序の検討"日腎会誌. 45. 215 (2003)

Shinsui 等：“AGE-RAGE 系统中的细胞毒性机制的检查”日本肾病学会杂志 45. 215 (2003)。

Fukami K et al.: "Advanced Glycation Endproducts and their receptor interaction promotes mesangial cell damage via angiotensin II and TGF-β."J.Am Soc Nephrology. 13. 654A (2002)

Fukami K 等人：“高级糖化终产物及其受体相互作用通过血管紧张素 II 和 TGF-β 促进系膜细胞损伤。”J.Am Soc Nephrology 13. 654A (2002)。