LPS刺激後のマクロファージ活性化のシグナル伝達を鉄イオンが担う可能性の検討

检查铁离子在 LPS 刺激后巨噬细胞激活的信号转导中发挥作用的可能性

• 批准号: 14770613
• 负责人: 竹内 丙午
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770613/
• 关键词: エンドトキシン; クッパー細胞; 鉄; 肝臓病学

平成14年度はエンドトキシン刺激後の肝マクロファージの細胞内鉄およびエンドトキシンにより誘導される発現調節因子の一過性の変動の検討を行った。1.)まずエンドトキシンにより刺激したマクロファージの細胞内で転写因子NF-kBの刺激直後の超短時間でのbinding activityの変化をおった。3分,5分,10分,30分、60分と検討を行い、活性の上昇が30分という早期こおいておこっていることが明らかになった。同時に検討したIRPのmNAへのbindingは有意の結果が得られず。2)エンドトキシン刺激後の肝マクロファージ内の非ヘム鉄の変動であるが、鉄イオンをキレーターでそれぞれ2価と3価で選択的に細胞外の培養液中で測定するととを検討したが,3分5分という極めて早期では変動を捕らえられなかった。ついでマクロファージを細胞ごとFe-59でラベリングし、細胞をエンドトキシンで刺激し、細胞を誘拐させ細胞質分画を分離しそのradioactivityを測定することで,細胞質の低分子鉄(chelatable iron)の変動を検討した。ピークでおよそ2倍程度であったっが、エンドトキシン刺激後わずか3分、5分で細胞内の低分子鉄が一過性に増加していることが明らかとなった。3)直接鉄負荷によるTNFaの発現誘導の検討であるが細胞培養液に単純に鉄を添加するだけでは、マクロファージの活性化TNFaの誘導は認めなかった。このため、次年度の検討としては細胞内にマイクロインジェクションで鉄を注入しTNFaあ変動を検討したい。

In 2014, the transient changes of intracellular iron and iron regulatory factors after liver stimulation were studied. 1.) The binding activity of NF-kB in cells after stimulation is very short. 3 points, 5 points, 10 points, 30 points, 60 points At the same time, the binding of IRP and mNA was found to be intentional. 2) After stimulation, the liver was stimulated and the iron was detected in the extracellular culture medium. The results showed that the iron was detected in the early stage of the liver stimulation. The activity of Fe-59 in the cytoplasm of the cells was measured after stimulation and separation of the cytoplasm. After stimulation, low molecular iron in cells increased transiently by 3 or 5 points. 3)Direct iron loading induced TNFa production in cell culture medium The next year's study was conducted in the presence of iron.