妊娠中毒症に対する血管内皮前駆細胞を用いた細胞治療の開発

开发利用血管内皮祖细胞治疗先兆子痫的细胞疗法

• 批准号: 14770835
• 负责人: 菅原 準一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770835/
• 关键词: 血管内皮前駆細胞; 妊娠; 妊娠中毒症

平成15年度は正常妊婦(20例)末梢血よりFicoll-gradient法を用いて単核球を分離、さらに細胞接着性の相違を利用して血管内皮前駆細胞(endothelial progenitor cells,EPC)の純化を行った。光学顕微鏡による形態学的観察では、得られた細胞は培養当初クラスターを形成、引き続いてクラスター周囲に紡錘形の細胞が増殖した。純化した細胞を4 chamber slidesに培養し、免疫細胞染色によるLDL uptake,UEA-1(lectin)染色を施行、二重染色された細胞を血管内皮前駆細胞とした。さらに細胞の性格を確認するために、CD31、von Willebrand Factor、eNOS、AC133による細胞免疫染色を行った。次に48 well dishに培養した細胞のクラスター数をカウントしたところ、妊娠週数が進むにつれてクラスター数が増加し、両者の間に正の相関関係を認めた。さらには同妊婦の血清中のEstradiol濃度と血管内皮前駆細胞クラスター数との関連を検討したところ、Estradiol濃度が上昇するに従い、末梢血中血管内皮前駆細胞クラスター数は増加し、極めて強い正の相関関係を認めた。以上の結果から、血管内皮前駆細胞は妊娠中の血管内皮機能の維持、胎盤形成、発育に重要な役割を担っている可能性が示唆された。さらに血管内皮前駆細胞の機能発現にはエストロゲンが深く関連すること、エストロゲンの血管保護作用は血管内皮前駆細胞を介して制御されている可能性が示された。今後、女性ホルモンによる血管内皮前駆細胞の機能制御を解明することによって、胎盤機能改善を目的とした細胞治療の開発が期待される。なお、これらの実験は東北大学医学部倫理委員会にてすべて承認されている。

In 2015, we purified endothelial progenitor cells (EPC) from peripheral blood of 20 normal pregnant women by Ficoll-gradient method. Optical microscopy was used to examine the morphology of the cells. Purified cells were cultured with 4 chamber slides, immunocyte staining with LDL uptake,UEA-1(lectin) staining with double staining with endothelial cells. Cell immunostaining for CD31, von Willebrand Factor, eNOS and AC133 was performed. The number of cells cultured in 48 well dishes increased, the number of cells cultured in 48 well dishes increased, and the correlation between the number of cells cultured and the number of cells cultured in 48 well dishes increased. The relationship between Estradiol concentration in pregnant women serum and the number of vascular endothelial cells was studied. The relationship between Estradiol concentration in pregnant women serum and the number of vascular endothelial cells in peripheral blood increased. These results suggest that VEC may play an important role in the maintenance of vascular endothelial function, placenta formation and development during pregnancy. The functional development of vascular endothelial cells is closely related to the vascular protective effect of vascular endothelial cells, which may be mediated by vascular endothelial cells. In the future, the development of cell therapy for the improvement of placental function is expected. The Ethics Committee of Northeastern University School of Medicine recognizes that