ヒト血管内皮細胞において局所麻酔薬が一酸化窒素産生に与える影響

局麻药对人血管内皮细胞一氧化氮生成的影响

• 批准号: 14771142
• 负责人: 高石 和美
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771142/
• 关键词: 一酸化窒素; 局所麻酔薬; ヒト大動脈内皮細胞; 血管内皮細胞

培養ヒト大動脈内皮細胞(HAEC)をアセチルコリンおよびIL-1βで刺激し、一酸化窒素合成酵素(NOS)活性に対する局所麻酔薬の影響を検索した。HAECにおいてアセチルコリンは内皮型NOS(eNOS)を活性化し、IL-1βは誘導型NOS(iNOS)を活性化した。NO産生量の比較にはNO測定キットを使用し、2.3-Diaminonaphthaleneを用いてNOの代謝産物であるnitrateおよびnitriteの量を測定した。その結果、局所麻酔薬のプロカインはHAECにおいてeNOSあるいはiNOS活性を抑制した(p<0.01)。リドカインはeNOSあるいはiNOS活性に対して影響を及ぼさなかった。また、eNOSは細胞膜のカベオレに存在するが、活性型は細胞質に遊離する。そのため細胞膜蛋白および細胞質蛋白を抽出しウェスタンブロット法によりeNOS蛋白の局在に対する局所麻酔薬の影響を検索した。その結果、eNOS蛋白の細胞質への遊離を局所麻酔薬は抑制する傾向を示したため現在更なる検索を続行している。さらに、カベオレ内のeNOSはカベオリンを介してアルギニントランスポーター1と結合している。アルギニンはNOSの基質であり細胞外からのアルギニン供給はNOS活性に影響を及ぼすとされている。そのため高速液体クロマトグラフィーによってアルギニン輸送量を測定し、局所麻酔薬が血管内皮細胞へのアルギニン輸送に与える影響について検索した。その結果、局所麻酔薬はアルギニン輸送を抑制する可能性が示唆された。

To investigate the effects of IL-1β stimulation and NOS activity on human vascular endothelial cells (HAEC) in culture. HAEC can activate endothelial NOS(eNOS) and IL-1β can activate inducible NOS(iNOS). Comparison of NO production and determination of the amount of nitrates and nitrites produced by 2.3-Diaminaphthalene The results showed that the activity of iNOS in HAEC was inhibited (p<0.01). For example, if you are interested in eNOS activity, you may be interested in eNOS activity. eNOS is active in cell membrane and free in cytoplasm. To investigate the effects of cellular membrane proteins and cytoplasmic proteins on the development of eNOS protein. As a result, eNOS protein has a tendency to be inhibited by cytoplasmic dissociation. In addition, eNOS in the media can also be used to collect information from the media. The extracellular matrix of NOS is affected by the extracellular matrix of NOS and the extracellular matrix of NOS is affected by NOS activity. To determine the amount of high-speed liquid transport, the effect of drug on the transport of vascular endothelial cells and the effect of drug on the transport of vascular endothelial cells. The results of this study indicate that there is a possibility that the transmission of the virus will be suppressed.