权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ブレオマイシン肺線維症のトリガー新規TGF-β遺伝子の働き

博来霉素触发肺纤维化的新型TGF-β基因的功能

基本信息

批准号：
14771283
负责人：
熊谷孝則
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

ブレオマイシン(BLM)は、精巣癌などの治療に用いられる優れた抗癌剤であるが、副作用として重篤な肺線維症を引き起こすため、その使用には常に制限が伴う。これまで、ヒト肺正常線維芽細胞(WI-38)にBLMを投与した際に引き起こされる遺伝子発現の変化を、Differential Display(DD)法により調査した結果、transforming growth factor β(TGF-β)のsuperfamilyに属すると考えられる遺伝子の発現が昂進することを発見した。RT-PCRにより、BLM投与後、約3時間後から本遺伝子の発現が昂進することを明らかにしている。本研究では、本遺伝子とBLM肺線維症の関係を明らかにすることを目的とした。DD法により得られた遺伝子は、その3'末端の一部の配列であったため、まず、全長型遺伝子を5'-RACE法によりクローニングすることを試みた。3'末端配列の情報に基づき、遺伝子特異的プライマー(GSP)を数種類作成後、Smart RACE cDNA Amplification Kit (Clontech)を用いて5'-RACEを行った結果、全長型遺伝子と考えられる断片を得ることができた。シークエンシングの結果、得られた遺伝子の3'末端配列は、TGF-β superfamily遺伝子と相同性を示したが、その5'側の配列はDatabase上の遺伝子と明確な相同性を示さなかった。現在、得られた全長型遺伝子を発現ベクターpcDNA 3.1(Invitrogen)に導入し、本遺伝子の過剰発現が線維芽細胞に及ぼす影響を調査している。また、得られた全長型遺伝子が目的の遺伝子でない場合も考慮し、5'-RACEによるクローニングも並行して行っている。

The use of BLM in the treatment of testicular cancer is usually limited by its side effects and severe pulmonary diseases. The results of this investigation, the investigation of the transformation and development of gene expression in BLM cells (WI-38), the Differential Display(DD) method, the superfamily of transforming growth factor beta (TGF-β), and the investigation of the development of gene expression in BLM cells (WI-38). About 3 hours after RT-PCR and BLM were administered, the expression of the gene increased. The purpose of this study is to clarify the relationship between BLM and lung disease. The DD method is used to obtain the sequence of genes from the 3'end of the gene. 3'-terminal alignment information, gene-specific amplification (GSP), the use of Smart RACE cDNA Amplification Kit (Clontech), the results of the full-length gene test The results of this study show that the identity of the 3'-terminal alignment of the gene, the identity of the TGF-β superfamily gene, and the identity of the 5'-side alignment of the gene on the Database are clear. Now, we have obtained the full-length gene expression vector pcDNA 3.1(Invitrogen) and introduced it, and investigated the effect of gene expression on cell growth and proliferation. For example, the full-length gene is a target gene, and the 5'-RACE gene is a target gene.