真核生物型チロシンリン酸化・脱リン酸化を介する抗生物質生産制御メカニズムの解明

阐明真核酪氨酸磷酸化和去磷酸化控制抗生素生产的机制

• 批准号: 18770175
• 负责人: 熊谷 孝則
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770175/
• 关键词: 放線菌; シグナル伝達; チロシンリン酸化; 抗生物質生産; 形態分化; 遺伝子破壊; イムノアフィニティーカラム; Streptomyces coelicolor

本年度は,放線菌Streptomyces(S.)coelicolorA3(2)に存在するチロシンリン酸化タンパク質について,それらによる形態分化および抗生物質生産制御機構を明らかにすることを目的とし,以下の研究を実施した。1チロシンリン酸化タンパク質SCO5717の遺伝子破壊株の作製これまで,S.coelicolorのチロシンリン酸化タンパク質としてSCO5717を同定しており,SCO5717遺伝子をS.coelicolorに導入すると,増殖の遅延および色素性抗生物質の生産抑制が認められることを明らかにしている。SCO5717の機能をさらに明らかにするため,昨年度,SCO5717破壊株作製のためのベクターを構築した。本年度は構築したベクターを用い,相同組換えを利用したsingle crossover法により,SCO5717破壊株を作製した。作製したSCO5717破壊株について,その表現型を観察した結果,破壊株は野生株に比べて早期に気中菌糸を形成するとともに,色素性抗生物質を早期に産生した。2新規チロシンリン酸化タンパク質の同定昨年度,新規に開発したイムノアフィニティークロマトグラフィー法により,S.coelicolorからチロシンリン酸化タンパク質の分離・濃縮を行った。そこで本年度は,二次元ゲル電気泳動法および質量分析法を用いることにより,その同定を行った。その結果,新規チロシンリン酸化タンパク質として,superoxide dismutaseを同定することができた。以上,本研究の成果として,放線菌チロシンリン酸化タンパク質の新規機能を明らかにすることができた。今後,抗生物質の生産制御への応用が期待できる。

This year は actinomycetes Streptomyces coelicolorA3 (S) (2) に す る チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative に つ い て, そ れ ら に よ る morphological differentiation お よ び antibiotic material production system of the royal institution を Ming ら か に す る こ と を purpose と し, the following の research を be applied し た. 1 チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative SCO5717 の heritage 伝 system broken 壊 strains の son こ れ ま で, S.c oelicolor の チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative と し て SCO5717 を with fixed し て お り, SCO5717 heritage 伝 son を S.c oelicolor に import す る と, raised colonization の 遅 delay お よ び pigment The <s:1> production inhibition of bioactive substances が is recognized as められる とを とを とを, ら て, に, て, る る. SCO5717 の function を さ ら に Ming ら か に す る た め, last year, SCO5717 broken 壊 strains for the の た め の ベ ク タ ー を build し た. This year は build し た ベ ク タ ー を い, in the same group え を using し た single crossover method に よ り, SCO5717 broken 壊 strains を as the し た. Cropping し た SCO5717 broken 壊 strains に つ い て, そ の phenotype を 観 examine し た results, broken 壊 seedlings に は wild than べ て early に 気 bacteria si を forming す る と と も に, pigment antibiotic early に を し た. 2 new rules チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative の with last year, the new rules に open 発 し た イ ム ノ ア フ ィ ニ テ ィ ー ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー method に よ り, S.c oelicolor か ら チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative の separation, enrichment を line っ た. そ こ で は this year, two yuan ゲ ル 気 swimming method お よ び を quality analysis with い る こ と に よ り, そ の with fixed line を っ た. そ の as a result, the new rules チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative と し て, superoxide dismutase を with fixed す る こ と が で き た. Above, this study achievements of の と し て, actinomyces チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative の new rules function を Ming ら か に す る こ と が で き た. In the future, the <s:1> production control of antibiotics へ 応 応 is expected to use が to look forward to で る る る.

项目成果

Identification and kinetic study of tyrosinase inhibitors found in sake lees

• DOI: 10.1021/jf062315p
• 发表时间: 2006-12-27
• 期刊: JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY
• 影响因子: 6.1
• 作者: Jeon, Hyung Joon;Noda, Masafumi;Sugiyama, Masanori
• 通讯作者: Sugiyama, Masanori

Purification and characterization of the second Streptomyces phospholipase A2 refolded from an inclusion body

• DOI: 10.1016/j.pep.2006.05.009
• 发表时间: 2006-11-01
• 期刊: PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
• 影响因子: 1.6
• 作者: Jovel, Santa Romero;Kumagai, Takanori;Sugiyama, Masanori
• 通讯作者: Sugiyama, Masanori

The mitomycin C (MMC)-binding protein from MMC-producing microorganisms protects from the lethal effect of bleomycin : crystallographic analysis to elucidate the binding mode of the antibiotic to the protein

来自产生MMC的微生物的丝裂霉素C（MMC）结合蛋白可防止博莱霉素的致死作用：晶体学分析阐明抗生素与蛋白质的结合模式

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Molecular Biology 360
• 作者: Danshiitsoodol;N.
• 通讯作者: N.