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エストラジオール分解微生物の性状解析と水環境保全への応用可能性

雌二醇降解微生物的特性分析及其在水环境保护中的潜在应用

基本信息

批准号：
14780436
负责人：
藤井克彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Muroran Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

近年になって、エストラジオール(E2)による魚メス化問題が深刻化しつつある。E2はヒトおよび家畜のし尿から排出されており、全国規模の環境調査でも多くの水環境から検出されており、E2の環境動態、生体影響、除去システムに関する研究の必要性が認識されつつある。そこで本研究では、E2分解菌の探索と性状解析を行った。上記汚泥試料をE2を唯一の炭素源とする無機塩類培養液に加え集積培養を行った後、同じ組成の寒天培地に培養液を摂取し、静置培養した。1週間後、寒天培地上に出現したコロニーを爪楊枝でピックアップし、新しい寒天培地に摂取、純化を行った。その結果、E2を唯一の炭素源として生育できる細菌ARI-1株が得られた。ARI-1のE2分解活性をフラスコ実験で検討した。E2を含む無機塩最少培地に菌を摂取し、HPLCで経時的に残留E2量を追跡した。その結果、分解菌は環境濃度の1000万倍に相当する高濃度E2を50日間で、150万倍のE2を20日間でほぼ完全に分解した。また、E2以外で環境汚染問題が懸念されつつあるエストロン、エストリオールに対する分解能も調べたところ、分解菌はこれらのエストロゲンも分解できることが示された。さらに、エストロゲンが分解された後に発生する代謝産物についてGCMSとNMRを用いて分析したところ、いずれのエストロゲンも炭酸ガスまたはそれに近い低分子量物質にまで分解されていることがわかり、環境浄化への応用に期待が持てる菌であることもわかった。さらに、生化学および分子生物学的手法によってARI-1株の系統解析を行ったところ、本菌株はこれまでに報告例のない新種であることが判明し、Novosphingobium tardaugenesと命名された。今後、本菌株が畜産排水中のE2除去に技術応用されることを期待したい。

In recent years, the problem of になって and エストラジオール (E2) による鱼メス has become more and more serious. E2 はヒトおよびLivestock urine から excretion されており、National scale environmental survey でも多くのwater environment から検出されており、E2のEnvironmental dynamics, biological effects, removal of システムに关するThe necessity of research がUnderstanding されつつある. This study is based on the exploration and analysis of E2 decomposing bacteria. The above-mentioned sludge sample E2 is the only source of carbon and the inorganic salt culture liquid is added and concentrated culture is performed. After 1 week, the したコロニーをpawpaw branch でピックアップし appeared on the Hantenpei ground, and the new しいHantenpei ground was taken out and purified を行った. As a result, the only carbon source of E2 is the ARI-1 strain of bacteria that is produced. ARI-1のE2 decomposes active ingredients. E2 contains a minimum amount of inorganic chloride and has been extracted from the soil, and the amount of residual E2 during HPLC can be traced. As a result, the decomposing bacteria can be equivalent to 10 million times of the environmental concentration of E2 in 50 days, and can be completely decomposed in 20 days of 1.5 million times of E2.また, environmental pollution problems other than E2 are not suspenseful. The decomposing bacteria can decompose the decomposing bacteria and decompose the decomposing bacteria.さらに, エストロゲンが decomposes された and produces する metabolite についてGCMS and NMR analysis using いてしたところ、いずれのエストロゲンもCarbonic acid is a low molecular weight substance that is decomposed into carbonic acid.わかり、Environmental purification への応用に愿がhold てる germ であることもわかった.さらに、Biochemistry およびThe technique of molecular biology によってARI-1 strain のsystem analysis を行ったところ、 This strain has been reported as a new species, Novosphingobium tardaugenesとnamedされた. In the future, it is expected that this strain will be used as a technology for removing E2 from livestock wastewater.