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放射線による組織傷害とその後の組織修復への糖鎖認識分子MGL1/2の関与

糖链识别分子MGL1/2参与辐射引起的组织损伤和随后的组织修复

基本信息

批准号：
14704055
负责人：
築地信
金额：
$ 8.07万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

胎児の正常発生過程におけるアポトーシスを起こした細胞の認識・排除機構にマクロファージがどの様に関与するかを検討することを考え、放射線による胎児の催奇形性に着目し、本研究を計画した。マクロファージが用いる認識分子の一つとしてガラクトースとN-アセチルガラクトサミンに結合するCタイプレクチン分子(MGL)に注目している。現在までに、妊娠マウスに放射線を照射することで誘導される胎児内のアポトーシスを起こした細胞の周囲にmMGL陽性細胞が集積していること、標識リコンビナントmMGLが切片上のアポトーシス小体に結合することが明らかになっている。胎児発生初期の放射線の催奇形性へのMGLの関与を検討した。Mgl+/-マウスを掛け合わせプラグを確認し妊娠10.5dpcにX線を全身照射し、36時間後に胎児を摘出し凍結切片を作製し、免疫組織学的解析を行った。TUNEL法にてアポトーシスを、抗体染色によってMGLを、標識リコンビナントMGLによって結合部位の検出を行った。ホモ欠損マウスにおいてMGL陽性細胞は消失していた。それに伴ってTUNEL法によって検出されるアポトーシスを起こした細胞数の増加が観察された。標識リコンビナントMGLの結合様式にはMGL遺伝子の欠損は影響がないことが確認された。ゆえにアポトーシスを起こした細胞の処理にMGLが関与していることが示唆された。本年度は新たにクローニングされた、mMGL2の欠損マウスの作製を行った。マウスゲノムライブラリーよりmMGL2のすべてのエクソンをコードするクローンを得、塩基配列を決定しターゲッティングベクターを設計した。相同組み換え体ES細胞をセレクションし、ブラストシストに注入することでキメラマウスを作成中である。

The study was carried out on the understanding and elimination of fetal growth and development. The recognition component of the N-terminal recognition component (MGL) is focused on the combination of the N-terminal recognition component (N-terminal recognition component) and the MGL. Now, pregnancy, radiation exposure, induction of fetal apoptosis, accumulation of mMGL-positive cells, identification of mMGL-positive cells on sections, and identification of mMGL-positive cells. The relationship between MGL and radiation singularity in early fetal development is discussed. The pregnancy was confirmed at 10.5 dpc by X-ray, and frozen sections were prepared after 36 hours. TUNEL method for detection of binding sites, antibody staining for detection of binding sites MGL positive cells disappeared without damage. The TUNEL method was used to detect the number of cells. Identification of MGL's combination of MGL's transmission and loss effects MGL is the only way to deal with this problem. This year, the company has launched a new system of production and maintenance of mMGL2. MGL2 is designed to be used for the determination of the base configuration. The same group of somatic ES cells were injected into the system.