未開拓微生物資源、特に放線菌の機能開発と利用法に関する研究

未开发微生物资源特别是放线菌功能开发利用研究

• 批准号: 14760065
• 负责人: 植木 雅志
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760065/
• 关键词: 放線菌; メバロン酸経路; テルペン系化合物; アンサマイシン系抗生物質; AHBA; 土壌放線菌; 微生物資源; メバロン酸; アミノ酸アナログ; Polyketide; Terpene

土壌中に数多く存在する放線菌から如何に特別な能力を有している放線菌のみを選び出すかが鍵である。まず、放線菌では非常にまれなテルペン系化合物に注目し、その前駆体を供給するメバロン酸経路の検出、特に、Mevalonate syhthaseとMevalonate kinaseの検出を行うPCR primerを設計した。設計したPrimerによって、特異的な増幅断片を得ることができ、断片及びその周辺の配列解析から確かにメバロン酸経路の検出に使用できることが確かめられた。土壌より分離された約200株の放線菌よりtotal DNAを抽出し、メバロン酸経路の検出を行ったところ、3株にそれが見られた。その3株についてそれらの代謝産物を調べた結果、特定の培地でほかの株には見られない代謝産物を見つけることができた。さらに3-amino-5-hydroxybenzoic acid(AHBA)の生合成に必須の酵素AHBA synthaseの遺伝子を特異的に増幅させるPCR primerを設計した。AHBAは、GeldanamycinやRifamycinなど重要な生物活性を有するansamycin系ポリケタイド抗生物質の生合成におけるstarte runitとして知られており、またMitomycin類の構成要素でもあり、二次代謝産物の重要な生合成前駆物質である。このprimer setを用いて、当方で以前に単離された新規のansamycin系抗生物質cytotrieninの生産菌からその生合成遺伝子群の取得を行い、その一部のクローニングに成功した。よって、このPrimer setを放線菌の選別に使用することができることがわかった。

There are a lot of different kinds of bacteria in the soil, and how to select and select special abilities. A PCR primer was designed for detection of Mevalonate syhthase and Mevalonate kinase in the presence of a precursor and a precursor. Design Primer, Specific Amplitude Fragment, Sequence Analysis, Accurate Analysis About 200 strains of actinomycetes were isolated from the soil, and the total DNA was extracted. The results of the regulation of metabolites in three strains, and the results of the regulation of metabolites in three strains in specific culture sites Recently, a PCR primer was designed for amplification of the enzyme AHBA synthase, which is essential for the synthesis of 3-amino-5-hydroxybenzoic acid(AHBA). AHBA, Geldanamycin and Rifamycin are important biological activities, and ansamycin is a starting runit in the biosynthesis of antibiotics, and Mitomycin is an important precursor to secondary metabolites. The primer set was successfully used in the production of ansamycin, a new antibiotic, and in the production of biosynthetic primers. The Primer set is used for the selection of bacteria.

项目成果

K.Ueda, T/Usui, H.Nakayama, M.Ueki, K.Takio, M.Ubukata, H.Osada: "4-Isoavenaciolide covalently binds and inhibits VHR, a dual-specific phosphatase"FEBS Letters. 525. 48-52 (2002)

K.Ueda、T/Usui、H.Nakayama、M.Ueki、K.Takio、M.Ubukata、H.Osada：“4-Isoavenaciolide 共价结合并抑制 VHR，一种双特异性磷酸酶”FEBS Letters。

Ueda K, Usui T, Nakayama H, Ueki M, Takio K, Ubukata M, Osada H.: "4-isoavenaciolide covalently binds and inhibits VHR, a dual-specificity phosphatase."FEBS Letters. 525. 48-52 (2003)

Ueda K、Usui T、Nakayama H、Ueki M、Takio K、Ubukata M、Osada H.：“4-异燕麦内酯共价结合并抑制 VHR，一种双特异性磷酸酶。”FEBS 快报。

H.-R.Ko, H.Kakeya, A.Yoshida, R.Onose, M.Ueki, M.Muroi, A.Takatsuki, H.Matsuzaki, H.Osada: "PC-766B and PC-766B, 16-membered macrolide angiogenesis inhibitors produced by Nocardia sp. RK97-56"J. Microbiol. Biotechnol.. (in press). (2003)

H.-R.Ko、H.Kakeya、A.Yoshida、R.Onose、M.Ueki、M.Muroi、A.Takatsuki、H.Matsuzaki、H.Osada：“PC-766B 和 PC-766B，16-

J.Nakazawa, J.Yajima, T.Usui, M.Ueki, M.Imoto, Y.-Y.Toyoshima, H.Osada: "A novel action of terpendole E on the motor activity of mitotic kinasin Eg5"Chemistry and Biology. (in press). (2003)

J.Nakazawa、J.Yajima、T.Usui、M.Ueki、M.Imoto、Y.-Y.Toyoshima、H.Osada：“萜烯 E 对有丝分裂激肽 Eg5 运动活性的新作用”化学与生物学

Nakazawa J, Yajima J, Usui T, Ueki M, Takatsuki A, Imoto M, Toyoshima YY, Osada H.: "A novel action of terpendole E on the motor activity of mitotic Kinesin Eg5."Chemistry & Biology. 10. 131-137 (2003)

Nakazawa J、Yajima J、Usui T、Ueki M、Takatsuki A、Imoto M、Toyoshima YY、Osada H.：“萜烯 E 对有丝分裂驱动蛋白 Eg5 运动活动的新作用。”化学