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リピドーム解析とプロテオーム解析を応用した新規脂質代謝酵素の同定と生理機能解析

利用脂质组分析和蛋白质组分析鉴定新型脂质代谢酶并进行生理功能分析

基本信息

批准号：
14760079
负责人：
森山達哉
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760079/
关键词：
脂質代謝脂質性メディエータープロテオーム解析リピドーム解析 2次元電気泳動リポタンパク質代謝 VLDL レジスチン脂質転送蛍光検出 MTP ウエスタンブロッティング 2-アラキドノイルグリセロールジアシルグリセロールリパーゼクローニング

项目摘要

申請者は脂質性メディエーターの産生機構の解明や脂質代謝、リポタンパク質代謝に関わる酵素類及びその機能を調節しうる食品成分に関して研究を進めている。これまでに、新規な脂質性メディエーターである2-AG(2-アラキドノイルグリセロール)の産生に関わると推定されるDGリパーゼの精製や候補遺伝子である新規リパーゼ様遺伝子のクローニングに成功した。また、クローニングした新規脂質代謝関連遺伝子産物が生体内でどのような脂質分子を基質として、どのような触媒反応を担当するのかという点に関して、遺伝子を導入した細胞の脂質プロファイルの解析(リピドーム解析:生体中の脂質成分を一括定量比較解析する手法)を用いて解析した。さらに、遺伝子導入細胞または共存培養細胞(ターゲット細胞)のタンパク質リン酸化のプロファイルを抗リン酸化タンパク質抗体を用いたプロテオーム解析によって解析する基盤技術が確立できた。さらに、本研究を発展させ、以下の2つの研究も行った。(1)脂肪細胞が分泌する代謝調節性ホルモンと推定されるレジスチンに関して、その生体内での役割を解明することをめざし、レジスチンの生理機能をトランスクリプトーム解析によって詳細に検討した。(2)肝細胞からのリポタンパク質分泌をモニターするELISAシステムを構築し、リポタンパク質(VLDL)分泌に影響を与える食品成分の探索に成功した。現在は、リピドーム解析とプロテオーム解析、トランスクリプトーム解析を駆使して、VLDL分泌抑制のメカニズムを解明することを試みている。

The applicant is interested in studying the mechanism of lipid metabolism and the regulation of enzymes and other functions in food ingredients. The production of 2-AG(2-AG) was estimated to be successful in refining and candidate genes of DG. The analysis of lipid metabolism related gene products in vivo, including quantitative comparative analysis of lipid components in vivo, is carried out at the point where lipid molecules play the role of matrix and catalyst. In addition, the gene introduced into the cells and the substrate technology for the analysis of the protein in the culture cells were established. This study was developed and the following 2 studies were conducted. (1)The metabolic regulation of adipocyte secretion is presumed to be related to the physiological function of adipocyte secretion in vivo. (2)The ELISA system for the production of VLDL in liver cells was successfully established. Now, try to resolve the problem of VLDL secretion inhibition.