担子菌類(キノコ)におけるD-アミノ酸の生理的役割の解明

阐明 D-氨基酸在担子菌（蘑菇）中的生理作用

• 批准号: 14760220
• 负责人: 渡邉 彰
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760220/
• 关键词: 担子菌; D-アミノ酸; ラセマーゼ; _D-アミノ酸

平成14年度は、担子菌Lentinus edodes(シイタケ)において、主に遊離型D-アラニンの分布について検討するとともに、担子菌類では初めて同菌の子実体より、D-アミノ酸生合成酵素の一つであるアミノ酸ラセマーゼ(既知のアミノ酸ラセマーゼと異なる酵素学的諸性質を保持)を精製した。そこで、平成15年度は,前年度の結果を踏まえ,以下の点について検討した。(1)L.edodesにおける遊離型D-アミノ酸の分布の解析高速液体クロマトグラフィーを用いた光学分割法により、L.edodesの菌糸体、未成熟子実体および成熟子実体の組織中に、遊離型D-アラニン、遊離型D-セリンに加え、少なくとも遊離型D-グルタミン酸および遊離型D-グルタミンを検出した。また、それら遊離型D-アミノ酸の含量は各生育段階において差があることから、各生育段階に対応した生理的役割を持つことが考えられた。(2)L.edodes由来のアミノ酸ラセマーゼの遺伝子レベルでの解析精製した新規アミノ酸ラセマーゼからN末端および内部アミノ酸配列を決定した。それらのアミノ酸配列に基づきプライマーを合成し、PCR法およびRACE法により本酵素をコードする遺伝子およびcDNAの全長を取得した。得られた塩基配列の解析の結果、本酵素は496アミノ酸残基をコードしていることが判明した。また、本酵素のアミノ酸配列の相同性解析の結果、既知のアミノ酸ラセマーゼとは相同性を示さなかった。以上の結果、L.edodes由来のアミノ酸ラセマーゼは、酵素学的諸性質の面に加え、遺伝子構造の面からも既知のアミノ酸ラセマーゼとは異なる新規性の高い酵素であることが示され、L.edodesのD-アミノ酸代謝には、極めてユニークな性質を持つ酵素が関与することが示唆された。

In Heisei 14, youdaoplaceholder7, basidiomycetes Lentinus Edodes (シ イ タ ケ) に お い て type, main に free D - ア ラ ニ ン の distribution に つ い て beg す 検 る と と も に and basidiomycete で は early め て with bacteria の son be body よ り, D - ア ミ ノ acid biosynthesis enzyme の a つ で あ る ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ (both know の ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ と different な る enzyme to learn the nature of the を keep) を refined し Youdaoplaceholder0. Youdaoplaceholder0 そ で で, Heisei 15 そ, the <s:1> result of the previous year を is in line with まえ. The following <s:1> points に まえ て検 て検 て検 て検 て検 discuss た. (1) L.e dodes に お け る free type D - ア ミ ノ acid の analytical high-speed liquid distribution の ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を with い た optical segmentation に よ り, L.e dodes の bacteria si, immature child be お よ の び son be mature body tissues に, free type D - ア ラ ニ ン, free type D - セ リ ン に え, less な く と も free type D -グ タ タ タ タ <s:1> acid および free type D-グ タ タ タ を検 を検 を検 out of た た. ま た, そ れ ら free type D - ア ミ の content は ノ acid fertility Duan Jie に お い て poor が あ る こ と か ら, each birth Duan Jie に 応 seaborne し た physical battle cut を hold つ こ と が exam え ら れ た. (2) L.e dodes origin の ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ の posthumous son 伝 レ ベ ル で の parsing refined し た new rules ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ か ら N terminal お よ び internal ア ミ ノ acid with column を decided し た. そ れ ら の ア ミ ノ acid with column に base づ き プ ラ イ マ ー を synthetic し, PCR method お よ び RACE method に よ り this enzyme を コ ー ド す る posthumous son 伝 お よ び cDNA の span を obtain し た. Have ら れ た salt base with column の analytical の results, the enzyme は 496 ア ミ ノ acid residues を コ ー ド し て い る こ と が.at し た. ま た, this enzyme の ア ミ ノ acid with column の identity resolution の results, both known の ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ と は identity を shown さ な か っ た. Above の results, L.e dodes origin の ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ は, enzyme to learn the nature of the の に add え, but 伝 の surface か ら も already know の ア ミ ラ ノ acid セ マ ー ゼ と は different な る new rules の high い enzyme で あ る こ と が shown さ れ, L.e dodes の D - ア ミ ノ acid metabolism に は, extremely め て ユ ニ ー ク な nature を つ leaven It is related to が and する とが とが to された.