担子菌類(キノコ)におけるD-アミノ酸の生理的役割の解明

阐明 D-氨基酸在担子菌（蘑菇）中的生理作用

• 批准号: 14760220
• 负责人: 渡邉 彰
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760220/
• 关键词: 担子菌; D-アミノ酸; ラセマーゼ; _D-アミノ酸

平成14年度は、担子菌Lentinus edodes(シイタケ)において、主に遊離型D-アラニンの分布について検討するとともに、担子菌類では初めて同菌の子実体より、D-アミノ酸生合成酵素の一つであるアミノ酸ラセマーゼ(既知のアミノ酸ラセマーゼと異なる酵素学的諸性質を保持)を精製した。そこで、平成15年度は,前年度の結果を踏まえ,以下の点について検討した。(1)L.edodesにおける遊離型D-アミノ酸の分布の解析高速液体クロマトグラフィーを用いた光学分割法により、L.edodesの菌糸体、未成熟子実体および成熟子実体の組織中に、遊離型D-アラニン、遊離型D-セリンに加え、少なくとも遊離型D-グルタミン酸および遊離型D-グルタミンを検出した。また、それら遊離型D-アミノ酸の含量は各生育段階において差があることから、各生育段階に対応した生理的役割を持つことが考えられた。(2)L.edodes由来のアミノ酸ラセマーゼの遺伝子レベルでの解析精製した新規アミノ酸ラセマーゼからN末端および内部アミノ酸配列を決定した。それらのアミノ酸配列に基づきプライマーを合成し、PCR法およびRACE法により本酵素をコードする遺伝子およびcDNAの全長を取得した。得られた塩基配列の解析の結果、本酵素は496アミノ酸残基をコードしていることが判明した。また、本酵素のアミノ酸配列の相同性解析の結果、既知のアミノ酸ラセマーゼとは相同性を示さなかった。以上の結果、L.edodes由来のアミノ酸ラセマーゼは、酵素学的諸性質の面に加え、遺伝子構造の面からも既知のアミノ酸ラセマーゼとは異なる新規性の高い酵素であることが示され、L.edodesのD-アミノ酸代謝には、極めてユニークな性質を持つ酵素が関与することが示唆された。

The distribution of basidiomycetes Lentinus edodes (basidiomycetes), Basidiomycetes Lentinus edodes (basidiomycetes), Basidiomycetes, Basidiomycetes The results of the previous year have been improved, and the following are important points. The main results are as follows: (1) the analysis of the distribution of L.edodes acid in the tissue of high-speed liquid, the use of optical slicing, L.edodes, immature and mature daughter tissues, the analysis of the distribution of acid in the tissue of high-speed liquids. There is a small amount of acid in the type of D-type. The content of acid in each growth stage was different from that in each growth stage, and the physiological service cutting in each growth stage was carried out. (2) the origin of L.edodes is to analyze the new rules, the acid content, the N-terminal phase, the internal acid column, the acid column and the determination. The whole length of the enzyme cDNA was obtained by using the method of PCR and RACE to determine the total length of the enzyme. The results of analysis were obtained, and the acid residues of this enzyme were identified by enzyme 496. The results of the homology analysis of the enzyme and the acid column of this enzyme show that the homology of the enzyme is similar to that of the enzyme. The results of the above results, the origin of L.edodes, the increase of enzyme properties, the increase of enzymes in noodles, the new patterns of high enzyme activity, L.edodesase D-acid replacement, enzyme retention, and so on.