担子菌の子実体誘導条件応答機構の解析とキノコ生産への効果的応用

担子菌子实体诱导条件响应机制分析及其在食用菌生产中的有效应用

基本信息

批准号：
20K05828
负责人：
渡邉彰
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kagawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K05828/
关键词：
担子菌ラッカーゼ子実体形成遺伝子発現キノコ酵素機能

项目摘要

本研究では、担子菌エノキタケを用いて、その子実体形成誘導条件応答機構について理解し、得られた成果の高効率なキノコ栽培への活用を目的としている。本研究の対象であるエノキタケの子実体形成は、菌床培地（固体培養系）を使用し、菌糸蔓延後、子実体形成誘導条件（低温誘導：培養温度の低温へ移行）を付与することにより実施しており、令和4年度は、主に以下の解析を行った。（1）子実体形成誘導条件である低温誘導の付与に応答して生産が上昇するラッカーゼアイソザイムに関して、生育が旺盛なカビを用いた異種宿主発現系から組換え酵素溶液を調製し、前年度に引き続き同調製酵素溶液の固体培養系への添加効果等について検討・解析を行った。また、調製した組換え酵素自体についても解析を進めた。これまでのところ、調製酵素溶液の添加効果解析についてはまだ結果を導くには至っていないが、調製した組換え酵素はエノキタケ由来の同酵素とは糖鎖の付加において差異があることが示唆され、現在、引き続きその他の諸性質について解析を進めている。（2）子実体形成誘導条件（低温誘導）の付与前後における菌糸体のRNA-Seq解析から発現量の上昇が認められた遺伝子オルソログ（タンパク質分解系に関与と推測）に着目し、同遺伝子産物のエノキタケの子実体形成過程における機能解析のため、菌糸蔓延後（子実体形成誘導条件下）の菌糸体に対して各種タンパク質分解酵素阻害剤の添加が及ぼす影響について解析を行った。現在、引き続きそれらの添加効果について検証と解析を進めている。（3）子実体形成を行わせる菌床培地に着目し検討を行った結果、含有する培地成分が菌体の生長を促す傾向を有していることが示唆された。現在、引き続き観察された生長促進傾向について検証と解析を進めている。

在这项研究中，我们旨在利用基本疗法理解基因体形诱导条件的反应机制，并利用在高效的蘑菇培养中获得的结果。通过使用细菌床培养基（固体培养系统）和菌丝体扩散后，效果床培养基（低温诱导：向低培养温度的过渡到低培养温度）进行了enokitake的基因体形成，这是本研究的主题。在2022财年，主要进行以下分析。（1）关于漆酶同工酶的产量增加，以响应低温诱导的促进，这是诱导果实体形成的条件，重组酶溶液的制备是由使用巨大生长的模具从剧烈生长的模具进行制备的，就像上一年一样，在上一年中，研究了制剂溶液的效果，并审查了固体培养系统的效果和分析。此外，还分析了制备的重组酶本身。到目前为止，尚未获得结果来分析添加制备的酶溶液的效果，但是已经提出，制备的重组酶与添加糖链中源自Enokitake的酶有所不同，目前我们正在继续分析其他特性。（2）专注于基因直系同源物（假定参与蛋白水解系统），其中在应用水果体形成诱导条件（低温诱导）应用前后对菌丝的RNA-Seq分析，我们分析了各种蛋白水解酶抑制剂对菌丝构建的序列构建的效果的效果（低温诱导），并分析了有效性的分析，并分析了有限的菌丝构成的效果。同一基因产物（Enokitake）分析的果实身体形成过程。目前，我们正在继续调查和分析这些添加的效果。（3）我们专注于允许体育体形成并进行研究的细菌床培养基，并建议包含的培养基成分倾向于促进细菌的生长。目前，我们正在继续调查和分析观察到的促进增长趋势。