コオロギ色素拡散ホルモン様ペプチドの日周期的発現の分子生物学的解析

蟋蟀色素扩散激素样肽昼夜节律表达的分子生物学分析

• 批准号: 03F03320
• 负责人: 富岡 憲治
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03320/
• 关键词: PDF; コオロギ; 視葉; 概日時計; 概日リズム; 神経ペプチド; Pigment-dispersing factor; 転写リズム

1.抗PDF抗体を用いて免疫染色を行い、共焦点レーザー顕微鏡により微細形態の検討を行った。視葉板PDFニューロン(PDFLa)の突起は抗体染色で強く染色されるバリコシティーとわずかしか染色されないきわめて細い部分とからなり、細胞体から直接伸張した突起が細かく分枝しながら、視葉板全体を神経支配していることがわかった。視髄PDFニューロン(PDFMe)は同様にバリコシティーを持つが、PDFLaに比べてその突起が太く、PDFLaとは容易に区別できる。PDFMeの突起は視髄前縁部全体にわたり、視葉板と視髄の接する部分まで神経支配しており、いくつかの分枝が視葉板にも進入していた。これらの結果から、PDFLaとPDFMeはそれぞれ異なる機能を有することが示唆された。2.視葉以外に、前額神経節にも左右6対のPDF免疫陽性細胞を確認した。これは初めての発見であり、これらの細胞のPDFの機能が興味深い課題である。3.染色強度の日周性を検討したところ、PDFMeではいずれの細胞でも、恒暗下で細胞体の染色強度に主観的昼に強くなる周期性が見られた。4.一日のいろいろの時刻で視葉からmRNAを抽出し、pdf遺伝子の塩基配列から設計したプライマーを用いて、real-time PCRによりpdf mRNAの発現の日周性を検討した。その結果、内部コントロールとする遺伝子の検討が残されてはいるが、PDFLa, PDFMeともに転写には日周リズムがあり、明期に高くなった。この結果はほぼ細胞体での免疫組織化学の結果と一致しているが、ELISAの結果とは一致しない。この相違は、視葉内の含有量には軸策内での蓄積、分泌など細胞体での合成以外の要因が関与するために生ずると考えられた。

1. PDF antibody を resistance with い て immune dyeing line を い, total focus レ ー ザ ー 顕 micromirror に よ り micro morphology の 検 line for を っ た. Optic lobe plate PDF ニ ュ ー ロ ン (PDFLa) の protuberant は antibody dyeing で strong く さ れ る バ リ コ シ テ ィ ー と わ ず か し か dyeing さ れ な い き わ め て fine い part と か ら な り, cell body か ら directly assert し た protuberant が fine か く branch し な が ら, optic lobe plate all を 経 god governs し て い る こ と が わ か っ た. Depending on the marrow PDF ニ ュ ー ロ ン (PDFMe) は with others に バ リ コ シ テ ィ ー を hold つ が, PDFLa に than べ て そ の protrusions が く, PDFLa と は easy に difference で き る. PDFMe の protuberant は marrow front department try all に わ た り, optic lobe plate と marrow の meet す る part ま で 経 god governs し て お り, い く つ か の branch が optic lobe plate に も into し て い た. こ れ ら の results か ら, PDFLa と PDFMe は そ れ ぞ れ different な る function を have す る こ と が in stopping さ れ た. 2. Immune-positive cells of the six pairs of <s:1> PDF on the left and right sides of the に of the prefrontal neural segment を confirm た た. <s:1> れ れ initial めて めて published であ, <s:1> れら <s:1> cellular <s:1> PDF が function が deeply interested in the research topic である. 3. The staining intensity の day week sex を beg し 検 た と こ ろ, PDFMe で は い ず れ の cells で も, constant silenced で cell body の に staining intensity 観 day に strong く な る periodic が see ら れ た. 4. 1 の い ろ い ろ の moment で optic lobe か ら mRNA を spare し, PDF but 伝 の salt base with column か ら design し た プ ラ イ マ ー を with い て, real - time PCR に よ り PDF mRNA の 発 の day week now sex を beg し 検 た. そ の results, internal コ ン ト ロ ー ル と す る heritage 伝 の son beg が 検 residual さ れ て は い る が, PDFLa PDFMe と も に planning write に は day week リ ズ ム が あ り, Ming period に high く な っ た. The <s:1> <s:1> results ほぼ ほぼ the cell body で <s:1> the immunohistochemical <e:1> results are と consistent, the <s:1> て るが るが るが and the ELISA <s:1> results are と <e:1> consistent, and the な な な. こ の は deemed, in the visual lobe の contain quantity に は shaft policy within で の accumulation, secrete な ど cell body で の synthetic outside の by が masato and す る た め に raw ず る と exam え ら れ た.

项目成果

Circadian changes in PDF content in the optic lobe and the brain of the cricket, Gryllus bimaculatus

蟋蟀视叶和大脑中 PDF 内容的昼夜变化

• 发表时间: 2004
• 期刊: Zoological Science 21
• 作者: Abdelsalam;Salaheldin
• 通讯作者: Salaheldin

Circadian cycling of the neuropeptide, pigment-dispersing factor (PDF) in the optic lobe of the cricket, Gryllus bimaculatus

蟋蟀视叶中神经肽、色素分散因子 (PDF) 的昼夜节律循环

• 发表时间: 2005
• 期刊: Comparative Biochemistry and Physiology 142B
• 作者: Abdelsalam;Salaheldin
• 通讯作者: Salaheldin

Circadian regulation of the pigment-dispersing factor in the optic lobe of the cricket, Gryllus bimaculatus

蟋蟀视叶色素分散因子的昼夜节律调节

• 发表时间: 2005
• 期刊: Comparative Biochemistry and Physiology 142B
• 作者: Abdelsalam;Salaheldin
• 通讯作者: Salaheldin