小児感染症の分子生物学的研究

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2001年に発見されたhuman metapnumovirus(hMPV)は、RSウイルス同様に様々な呼吸器疾患(細気管支炎、喘息様気管支炎等)の原因ウイルスとして注目されている。我々の研究グループは本ウイルスの分離法、RT-PCR法によるウイルスゲノムの検出法、蛍光抗体法による抗体検査法を確立して、以下の事項を明らかにしてきた。(1)呼吸器感染症患者から採取した咽頭鼻汁ぬぐい液268検体中7検体(2.6%)よりウイルスが分離された。(2)咽頭鼻汁ぬぐい液637検体中57検体(8.9%)でRT-PCR陽性であった。(3)1か月から35歳までの血清142検体について抗hMPV抗体を検索したところ、抗体保有率は72.5%で、加齢と共に抗体陽性率は上昇した。(4)RT-PCR法にてhMPVの存在が証明された患者の急性期と回復期のペア血清中の抗hMPV抗体価を測定したところ、10組中8組で4倍以上の抗体価の上昇を認めた。これらの研究成果を元に本年度中に達成された、あるいは進行中の研究を列記する。(1)分離されたウイルス7株のN,P,M,F,M2,SH,Gの塩基配列を決定して分子系統樹を作製した。これら7株とすでに塩基配列が発表されている3株、計10株は2つの大グループ、4つのサブグループのいずれかに属することを明らかにした。ウイルスの表面糖蛋白のひとつG蛋白は各株間で大きく異なっていたが(33%)、4つのサブグループ内ではよく保たれていた(88-96%)。hMPVの中和抗体を考える上で重要である。(2)hMPV感染細胞をマウスに免疫してモノクローナル抗体を作製した。抗F及びN蛋白抗体が得られ、現在解析中である。(3)Baculovirusを利用してF蛋白を合成して、ヒト血清中の抗F蛋白抗体価を測定した。その値は通常のIF法を用いて測定した抗hMPV抗体価とよく相関した。