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小児感染症の分子生物学的研究

儿科传染病的分子生物学研究

基本信息

批准号：
03F03348
负责人：
有賀正
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

2001年に発見されたhuman metapnumovirus(hMPV)は、RSウイルス同様に様々な呼吸器疾患(細気管支炎、喘息様気管支炎等)の原因ウイルスとして注目されている。我々の研究グループは本ウイルスの分離法、RT-PCR法によるウイルスゲノムの検出法、蛍光抗体法による抗体検査法を確立して、以下の事項を明らかにしてきた。(1)呼吸器感染症患者から採取した咽頭鼻汁ぬぐい液268検体中7検体(2.6%)よりウイルスが分離された。(2)咽頭鼻汁ぬぐい液637検体中57検体(8.9%)でRT-PCR陽性であった。(3)1か月から35歳までの血清142検体について抗hMPV抗体を検索したところ、抗体保有率は72.5%で、加齢と共に抗体陽性率は上昇した。(4)RT-PCR法にてhMPVの存在が証明された患者の急性期と回復期のペア血清中の抗hMPV抗体価を測定したところ、10組中8組で4倍以上の抗体価の上昇を認めた。これらの研究成果を元に本年度中に達成された、あるいは進行中の研究を列記する。(1)分離されたウイルス7株のN,P,M,F,M2,SH,Gの塩基配列を決定して分子系統樹を作製した。これら7株とすでに塩基配列が発表されている3株、計10株は2つの大グループ、4つのサブグループのいずれかに属することを明らかにした。ウイルスの表面糖蛋白のひとつG蛋白は各株間で大きく異なっていたが(33%)、4つのサブグループ内ではよく保たれていた(88-96%)。hMPVの中和抗体を考える上で重要である。(2)hMPV感染細胞をマウスに免疫してモノクローナル抗体を作製した。抗F及びN蛋白抗体が得られ、現在解析中である。(3)Baculovirusを利用してF蛋白を合成して、ヒト血清中の抗F蛋白抗体価を測定した。その値は通常のIF法を用いて測定した抗hMPV抗体価とよく相関した。

In 2001, we saw the causes of respiratory diseases (bronchitis, wheezing, bronchitis, etc.) caused by human metapnumovirus (hMPV) and RS. We have studied the method of separation, the method of RT-PCR, the method of photoantibody, the method of antibody, the method of confirmation, and the following items. (1) in patients with respiratory infection, 7 bodies (2.6%) in fluid 268 were collected from patients with respiratory infection. (2) 57 body (8.9%) of pharynx nasal juice liquid 637 (8.9%) RT-PCR sexual dysphagia. (3) 1. The antibody retention rate was 72.5%, and the sex rate of co-antibody was higher than that of anti-hMPV antibody. (4) the detection of anti-hMPV antibody in the serum of patients with acute respiratory syndrome was confirmed by RT-PCR method, and 8 out of 10 groups were detected by 4-fold anti-hMPV antibody assay. In the course of this year, the results of the research have been reviewed, and a series of studies have been carried out. The main results are as follows: (1) the molecular system is determined by the molecular system of 7 strains of the plant, which is separated from the seven strains of the plant. There are 7 plants in the list, 3 plants in the table, 10 plants in 2 plants, and 4 plants in the family. The concentration of surface glycoproteins and G proteins in each strain was 33% and 4% respectively, and the concentration of G protein was 88%. HMPV neutralizing antibody test showed that it was very important. (2) the cells infected with hMPV were immunized and immunized with antibodies. Anti-F and anti-N protein antibodies have been obtained and are now being analyzed. (3) Baculovirus was used to synthesize and determine the antibody against F protein in serum. The IF method is usually used to determine the anti-hMPV antibody.