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発育段階の制御における前胸腺刺激ホルモン受容体の機能解析

前胸激素受体调节发育阶段的功能分析

基本信息

批准号：
03J10084
负责人：
丹羽隆介
金额：
$ 5.44万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)前胸腺刺激ホルモン(PTTH)の受容体候補遺伝子(PGR)のショウジョウバエ相同分子の機能を遺伝学的に解析するために、PGRに対するRNAi系統を用いた表現型を脱皮変態の異常の有無を中心に解析している。RNAiによって90%以上の転写産物の低下を認めたが、目立った表現型はなかった。(2)PGRを介したPTTH刺激が、いかにして前胸腺のエクジソン合成を制御するのかを解析するために、前胸腺機能を反映する遺伝子マーカーが欲しい。前胸腺において特異的に機能する遺伝子の同定およびその機能解析を試みた。DNAマイクロアレイやdifferential displayを用いた解析から、複数の候補遺伝子を同定した。このうちの1つCyp306a1は、P450ファミリーに属する新規分子であり、エクジソン生合成の中間段階の代謝過程を担うことを生化学的に示した。さらに、ショウジョウバエにおける一次構造上の相同分子も前胸腺で特異的に発現しており、エクジソン生合成過程に必須の役割を果たすことを遺伝学的手法からも証明した。また、別の新規遺伝子neverlandもエクジソン生合成および昆虫の発育に必須であることを明らかにした。すなわち、neverland機能低下個体では、ショウジョウバエの発育が1齢幼虫期で停止するが、この表現型は食餌中にエクジソンを投与することによって回復した。neverlandは脊椎動物にも相同分子が存在しており、進化的に保存されたステロイド生合成経路の新規制御因子であることが示唆される。さらに、これらの遺伝子をマーカーとして、PTTHシグナルによって転写制御を受けるかどうかを検討した。その結果、検討した4つのマーカーのうち、disembodiedと呼ぶP450遺伝子のみがPTTHによって顕著な転写上昇を示した。PTTHの入力によるエクジソン生合成経路の遺伝子の制御には差があることが分かった。

(1)The expression of receptor candidate gene (PGR) in PTTH was analyzed by molecular function analysis. The expression of PGR was analyzed by RNAi system. More than 90% of RNAi products are recognized as low phenotypes. (2)PGR mediates PTTH stimulation and analysis of pre-thymus function. The function of the anterior thymus is determined by the function of the anterior thymus. DNA analysis and differential display Cyp306a1 and P450 are new molecules involved in metabolic processes at intermediate stages of biosynthesis. In addition, the molecular structure of the same gene is the same as that of the thymus, and the specific gene is the same as that of the thymus. The gene synthesis process must be carried out in a scientific way. New regulations for insect reproduction and development are necessary. The phenotype of individuals with low neverland function is that they stop developing at the first larval stage and recover from feeding. Neverland is the same molecule in vertebrates. It's a new regulatory factor for the evolutionary process. The first time I saw him was when I saw him. P450 PTTH's entry into the system is difficult to control.