シナプス形成初期過程の分子機構の解明

阐明突触形成早期过程的分子机制

• 批准号: 03J11889
• 负责人: 風間 北斗
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J11889/
• 关键词: シナプス; CaMKII; カルシウム; 逆行的調節; イメージング; 自家蛍光; フラビンタンパク質; myopodia

シナプスの形成には、神経細胞(プレ)とその標的細胞(ポスト)間の綿密な相互作用が重要であると示唆されているが、その内、ポストがプレに働きかける機構に関しては未知な部分が多い。私は、ショウジョウバエ幼虫の神経-筋結合系を用いて、ポスト内の酵素CaMKIIがプレの機能と形態を逆行的に調節することを報告してきた。本年度は、シナプス形成期における標的細胞の挙動を調べるもう一つのアプローチとして、筋肉細胞内で自発的に発生する自家蛍光のイメージングを行った。青色励起光照射の下で筋肉細胞を観察すると、一過的に緑色蛍光が上昇する現象が検出された。一部の蛍光信号は鋭いピークとして出現したが、残りの信号は、立ち上がると数十秒の間安定した水準を保ち続け、その後鋭く減衰するという、細胞に起因するシグナルとしては類のないキネティクスを示した。自家蛍光シグナルは、細胞外のカルシウムイオン依存的に発生した。薬理学的実験により、自家蛍光はミトコンドリア内に存在するフラビンタンパク質に起因することが分かった。また、蛍光シグナルは自発的に出現するものの、その発生頻度が神経の投射に大きく依存した。蛍光強度が、筋肉細胞の中でも特にシナプス部で大きく上昇する事実と合わせて、自家蛍光変動がシナプス形成過程に関わる生理的現象を反映している可能性が提起された。本研究は、シナプス形成期に、標的細胞内で自発的に発生する自家蛍光シグナルを、生体において報告した最初の例である。自家蛍光イメージングは、シナプス形成の理解に大いに貢献する可能性がある。また、もし、先行研究から予想されるように自家蛍光強度とカルシウムイオン濃度との間に相関があることが判明すれば、自家蛍光イメージングは、ミトコンドリアの活性化状態を調べる手法としてだけでなく、新しい非侵襲的なカルシウムイメージング法としても適用できる可能性がある。

シ ナ プ ス の form に は, god 経 cells (プ レ) と そ の target cells (ポ ス ト) between の tight-knit な interaction が important で あ る と in stopping さ れ て い る が, そ の, ポ ス ト が プ レ に 働 き か け る institutions に masato し て は が い more unknown な part. Private は, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ larvae 経 の god - jin combination of を い て, ポ ス ト の enzyme in CaMKII が プ レ の を retrograde に adjustment function と form す る こ と を report し て き た. This year は, シ ナ プ ス formation に お け る target cells の 挙 motion を べ る も う a つ の ア プ ロ ー チ と し で て, brawn cell from 発 に 発 raw す る their 蛍 light の イ メ ー ジ ン グ を line っ た. Cyan wound up under the light irradiation の で brawn cells を 観 examine す る と, a に 蛍 green light of rising が す る phenomenon が 検 out さ れ た. A の 蛍 optical signal は sharp い ピ ー ク と し て in し た が and residual り の signal は, vertical ち が る と tens of seconds between の settle し た level を bartender ち 続 け, そ の after sharp く damping す る と い う, cell に cause す る シ グ ナ ル と し て は class の な い キ ネ テ ィ ク ス を shown し た. The に that are dependent on the 蛍 light of the home and シグナ シグナ シグナ シグナ た, and the extracellular <s:1> カ シウム シウム <s:1> and <s:1> <s:1> produce た. 薬 neo-confucianism of be 験 に よ り, their 蛍 light は ミ ト コ ン ド リ ア に exist within す る フ ラ ビ ン タ ン パ ク cause qualitative に す る こ と が points か っ た. ま た 蛍 light シ グ ナ ル は since 発 に appear す る も の の, そ の 発 raw frequency が god 経 の projection に big き く dependent し た. 蛍 light intensity が, brawn cellular の で も, に シ ナ プ ス department で big き く rise す る things be と close わ せ て, their 蛍 light - が シ ナ プ ス formation に masato わ る physiological phenomenon を reflect し て い る possibility が filed さ れ た. は, this study シ ナ プ ス で formation に, target cell from 発 に 発 raw す る their 蛍 light シ グ ナ ル を, living body に お い て report し た の patients initially で あ る. Their 蛍 light イ メ ー ジ ン グ は, シ ナ プ ス forming の understanding に big い に contribution す る possibility が あ る. ま た, も し, leading research か ら to think さ れ る よ う に their 蛍 light intensity と カ ル シ ウ ム イ オ ン concentration と の に phase between masato が あ る こ と が.at す れ ば, their 蛍 light イ メ ー ジ ン グ は, ミ ト コ ン ド リ ア の activation state を adjustable べ る gimmick と し て だ け で な く, new し い of noninvasive な カ ル シ ウ ム イ メ ー ジ ン グ method と し て も optimum Use で る る possibility がある.

项目成果

H.Kazama, T.Morimoto-Tanifuji, A.Nose: "Postsynaptic activation of CaMKII promotes coordinated pre- and postsynaptic maturation of Drosophila neuromuscular junctions"Neuroscience. 117. 615-625 (2003)

H.Kazama、T.Morimoto-Tanifuji、A.Nose：“CaMKII 的突触后激活促进果蝇神经肌肉接头的突触前和突触后协调成熟”神经科学。