Untersuchungen zur Koppelung von Muscarinrzeptoren an G-Proteine und Suche nach Muscarinrezeptorliganden mit Hilfe von Hefezellen

利用酵母细胞研究毒蕈碱受体与G蛋白的偶联以及寻找毒蕈碱受体配体

• 批准号: 5338020
• 负责人: Dr. Anne-Ulrike Trendelenburg
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Experimentelle und Klinische Pharmakologie und Toxikologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5338020?language=en
• 关键词: Untersuchungen; zur; Koppelung; von; Muscarinrzeptoren

Diverse Muskarinrezeptor-Subtypen (M1-M5) sollen als Modell dienen, um auf struktureller Ebene die Selektivität der Rezeptor/G-Protein-Kopplung zu untersuchen und um neue Muskarinrezeptor-Liganden zu identifizieren. Hierzu soll Hefe-Expressionstechnologie eingesetzt werden, die die Anwendung umfangreicher genetischer Screeningtechniken erlaubt; dies ist in Säugetierzellen nicht möglich. Im einzelnen ist geplant, kürzlich entwickelte, Muskarinrezeptor-exprimierende Hefezellstämme zu benutzen, die nur bei aktivierter Rezeptor/G-Protein-Kopplung wachsen. In einem ersten Schritt sollen Bibliotheken mutierter Muskarinrezeptoren (gebildet durch Zufallsmutagenese) in Hefezellen exprimiert werden, die verschiedene G-Protein a -Untereinheiten exprimieren. Ziel dieser Untersuchungen ist es Muskarinrezeptor-Mutanten zu isolieren, die neuartige Eigenschaften in der G-Proteinkopplung aufweisen. Eine Sequenz-Analyse dieser mutierten Rezeptoren soll helfen, die molekularen Strukturen zu definieren, die für die Selektivität der Rezeptor/G-Protein-Kopplung entscheidend sind. In einem zweiten Schritt sollen die Muskarinrezeptor-exprimierenden Hefezellstämme mit Peptid-Bibliotheken, die für Zufallspeptide kodieren, transformiert werden; das experimentelle System wird so gewählt, daß die entsprechenden Peptide sezerniert werden. Da die eingesetzten Hefezellstämme nur bei aktivierter Rezeptor/GProtein-Kopplung wachsen, werden nur solche Klone wachsen, die Peptide mit agonistischer Aktivität sezernieren. Es scheint wahrscheinlich, daß auf diese Weise neuartige Peptide isoliert werden, die selektiv spezifische Muskarinrezeptor-Subtypen aktivieren können. Dies ist ohne Zweifel von hoher therapeutischer Relevanz, da es bisher keine Subtyp-selektiven muskarinische Liganden gibt; darüberhinaus wären solche Liganden von grosser Bedeutung für die Untersuchung der physiologischen Aufgaben der einzelnen Muskarinrezeptor-Subtypen.

不同的muskarinrezreceptor - subtypen (M1-M5) sollen als model dienen， um auf struktureller Ebene die Selektivität der Rezeptor/G-Protein-Kopplung zu untersuchen和um neue Muskarinrezeptor-Liganden zu identifiien。hefe - expressionstechnology (hefe - expressionstechnology, hefe - expressionstechnology)；死亡列表在Säugetierzellen night möglich。[3] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1]In einem ersten Schritt sollen Bibliotheken muttierter Muskarinrezeptoren (gebildet durch Zufallsmutagenese) In Hefezellen experimental werden, die verschiedene G-Protein a -Untereinheiten experimental。张志强，张志强，张志强，等。研究了g -蛋白的互作特性，并对g -蛋白互作特性进行了分析。e - sequence - analyse diesermutierten Rezeptoren soll helfen, die molecular aren Strukturen zu definieren, die f<s:1> r die Selektivität der Rezeptor/G-Protein-Kopplung entscheidend sind。In einem zweiten Schritt sollen die Muskarinrezeptor-exprimierenden Hefezellstämme mit peptide - bibliotheken, die fir zufaller peptide kodieren, transformert werden；das experimentelle系统风所以gewählt， daß die entsprechenden肽sezerniert werden。Da die eingesetzten Hefezellstämme nur bei aktiviter Rezeptor/GProtein-Kopplung wachsen, werden nur solche Klone wachsen, die Peptide mit agonistischer Aktivität sezernieren。Es scheint wahrscheinlich, daß auese Weise neutige Peptide isoliert werden, die selektiv spezifische muskarinrezreceptor - subtypen activen können。德国疾病防治协会（diist ohne Zweifel von hoher therapeutischer Relevanz），德国疾病防治协会（Dies bisher keine subtype -selektiven muskarinische Liganden gibt）；dar<s:1> berhinaus wären solche Liganden von grosser Bedeutung fdr . l . die Untersuchung der physiologischen Aufgaben der einzelnen muskarinrezreceptor subtypen。