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酵母HOG経路のシグナル特異性決定に関わるPbs2MAPKKの足場機能の研究

Pbs2MAPKK参与确定酵母HOG通路信号特异性的支架功能研究

基本信息

批准号：
15770082
负责人：
舘林和夫
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770082/
关键词：
出芽酵母 HOG経路高浸透圧 MAPキナーゼ PBS2 STE11 STE50 ドッキング・サイト Pbs2 Ssk2 シグナル特異性

项目摘要

生物は絶えず生活環境の変化にさらされており、こうした環境ストレスに迅速に適応するために、ストレス応答MAPキナーゼ(MAPK)情報伝達経路が存在する。この経路は出芽酵母からヒトにいたるまでよく保存されており、出芽酵母では高浸透圧に対するHOG経路が存在する。HOG経路にはMAPKキナーゼ(MAPKK)であると同時に足場蛋白質でもあるPbs2が存在し、HOG経路を構成する複数の因子と結合しシグナル伝達の足場となることで、迅速かつ正確なシグナル伝達を可能にしている。Pbs2の足場機能を分子レベルで明らかにするため、相互作用する因子との結合の分子様式について詳細に解析した。1.私は昨年度Pbs2MAPKKのN末領域がSte11 MAPKKKと結合することを見いだした(Tatebayashi et al.;EMBO.J.2003)。本研究ではPbs2のN末に系統的な欠失を導入し、共沈実験によりSte11との結合領域を詳しく解析した。Ste11結合領域はPbs2のN末に2カ所存在し、どちらか一方だけでもSte11との結合は保持され、両者を同時に欠失させてはじめて結合がなくなることがわかった。この領域は私が昨年度発見したPbs2のSsk2/Ssk22 MAPKKKとのドッキング・サイトとは異なっており、Pbs2は複数のMAPKKKに対して異なるドッキング・サイトを有していることがわかった。2.Ste11結合蛋白質のSte50がSte11を介することなしにPbs2と結合することがわかった。Pbs2内のSte50結合部位を調べたところ、Ste11に対するPbs2の2カ所の結合部位がSte50との結合にも関与することが明らかになった。Pbs2、とSte50の結合はこれまで報告されておらず、HOG経路の活性化や特異性決定の分子機構を解明する大きな手がかりになると考えられた。

The biological environment changes rapidly, and the MAP (MAPK) information transmission pathway exists. This pathway is protected from budding yeast by high osmotic pressure. HOG pathway MAPK (MAPKK) can be detected simultaneously with the presence of Pbs2 protein in the field, HOG pathway can be composed of multiple factors, and the combination of these factors can quickly and accurately detect the presence of Pbs2 protein in the field. Pbs2's foot field function is analyzed in detail by molecular formula, interaction factor and combination. 1. Pbs2MAPKK and N terminal fields Ste11 MAPKKK are combined (Tatebayashi et al.) EMBO.J.2003)。In this paper, we analyze the missing parts of PBS2 and N-terminal systems, and analyze the co-sinking parts of N-terminal systems. Ste11 combines with Pbs2 and N ends 2, and exists in one direction. Ste11 combines with Pbs 2 and N ends 2 and remains in one direction. This domain is currently open to Pbs2 and Ssk2/Ssk22 MAPKKK and Pbs2 MAPKKK. 2. Ste11 binding protein Ste50 and Ste11 binding protein The binding site of Ste50 in Pbs2 is modulated, and the binding site of Ste11 in Pbs2 is modulated. Pbs2 and Ste50 binding are reported to be responsible for the activation and specificity of HOG pathways.