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WASPファミリータンパク質の脳神経系の形態形成シグナルにおける役割

WASP 家族蛋白在大脑和神经系统形态发生信号中的作用

基本信息

批准号：
15770124
负责人：
末次志郎
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770124/
关键词：
N-WASP mDab1 Ar2 3 complex actin cytoskeleton 細胞運動チロシンキナーゼ Arp2

项目摘要

mDab1はreelinシグナルにおいて脳の発生における細胞移動をコントロールする遺伝子である。細胞移動はアクチン細胞骨格の再構成を伴い、これはしばしば普遍的なアクチン細胞骨格制御タンパク質によってなされる。そこで、mDab1を非神経細胞(COS-7細胞)に異所的に発現させてみたところ、フィロポディア形成を誘導すること細胞の計時的観察により見いだした。このフィロポディア形成はN-WASP依存的であることを,N-WASPのドミナントネガティブ体を用いて示した。N-WASPはmDab1とin vitro, COS-7細胞中、および胎児脳において相互作用することを免疫沈降実験により確認した。さらに興味深いことに、N-WASPとの相互作用およびフィロポディア形成にはmDab1のN末部のPTBドメインだけで必要十分だった。精製したmDab1のPTBドメインはN-WASPをin vitroで活性化し、Arp2/3複合体依存的なアクチン重合を引き起こした。reelinは神経細胞でSrcファミリーキナーゼを活性化し、mDab1のリン酸化を誘導することが知られていたので,Srcファミリーキナーゼの役割について検討した。COS-7細胞中でmDab1はSrcファミリーキナーゼによってリン酸化されることを見いだし、このリン酸化はmDab1のポリユビキチン化、および分解を誘導した。興味深いことに、mDab1のリン酸化はフィロポディア形成を抑制した。reelinと神経細胞の接触は、大脳発生において神経細胞の移動を止め、大脳の層構造の構築に関わると考えられているので、mDab1がSrcによるリン酸化によりフィロポディア形成能を消失することは、神経細胞がreelin刺激で止まることを反映している可能性が示唆された。mDab1は胎児由来の初代培養神経細胞において成長円錐の先端に存在したが、この神経細胞をreelinで処理し、mDab1のリン酸化を誘導しても神経細胞の形態には顕著な変化が見られなかった。従って、mDab1-N-WASPの経路が、実際の神経細胞移動においてどのような役割を持っているか、初代培養系ではでは明らかにできなかった。

mDab1 reelin-induced cell migration Cell migration is associated with the remodeling of the cellular skeleton, which is common in cellular skeleton control. In addition, mDab-1 cells were observed in the development of heterosis and induction of heterosis in non-neuronal cells (COS-7 cells). The N-WASP has been developed into a new type of N-WASP. N-WASP mDab1 in vitro, COS-7 cells, fetal interaction, immunoprecipitation, etc. The interaction between N-WASP and mDab1 is very important. Refined mDab1 PTB in vitro activation, Arp2/3 complex dependent recombination Reelin is a neurotransmitter that activates mDab1 and activates mDab1. In COS-7 cells, mDab1 was induced to undergo transformation and decomposition. The formation of mDab1 and mDab 2 is inhibited. Reelin and neuronal contact, development, migration, and construction of macrocellular structures are related to the possibility that mDab1 can be formed without reelin stimulation. mDab1 is the precursor to growth cones in primary cultured neurons, reelin treatment of neurons, and induction of mDab1 acidification in neurons. The mDab1-N-WASP pathway, the actual neuronal cell movement, and the primary culture system are all different.